Cовременные технологии получения и сохранения телят
Скотоводство – важнейшая отрасль животноводства. Она обеспечивает население такими продуктами питания, как молоко и мясо, служит источником сырья для пищевой, кожевенной, медицинской и других видов промышленности. Молоко – уникальный продукт питания, широко используемый как в свежем, так и в переработанном виде. Мясо крупного рогатого скота считается самым ценным по вкусовым качествам. По сообщению В.И. Новака (2002), одна корова может обеспечить молоком около 15 человек. Кроме того, ежегодно от нее получают теленка, откорм которого дает примерно 260 кг говядины. Помимо этого от каждой коровы в год получают до 10 т навоза — отличного органического удобрения, повышающего урожайность всех сельскохозяйственных культур.
Воспроизводство стада — наиболее сложный и трудоемкий производственный процесс в скотоводстве. Объясняется это тем, что основной показатель этой работы — выход телят зависит от многих факторов: возраста животных, их здоровья, физиологического состояния половой системы, уровня кормления, условий содержания, организации естественной случки или искусственного осеменения, профессионального уровня специалистов, занимающихся работой по воспроизводству стада животных и т.д. Кроме того, отрицательное влияние на выход телят оказывают и биологические особенности крупного рогатого скота, такие как большая продолжительность беременности (285 дней), низкая плодовитость (обычно за одни роды получают одного теленка), отрицательная корреляция (зависимость) между продуцированием молока и воспроизводительной функцией коровы. Поэтому необходимо использовать все резервы для увеличения выхода телят — от подбора родителей и осеменения до рождения и сохранения родившегося молодняка.
В предлагаемой брошюре, на основе многолетних исследований и практической работы, описываются различные методы получения телят, и раскрывается природа факторов, влияющих на этот процесс. Даются практические советы по сохранению телят. Описываются новейшие достижения науки в познании процесса воспроизведения животных.
ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ВОСПРОИЗВОДСТВА ЖИВОТНЫХ
Отбор и подбор животных
Работу по воспроизводству стада надо начинать с отбора самцов и самок. При отборе животных обращают внимание на крепость костяка, на развитие статей, связанных с органами дыхания, пищеварения, половой сферы, развитие средней трети туловища, тазового пояса и т.д. Особое внимание обращают на выраженность полового диморфизма.
Е. А. Богданов писал: «Мужественность самца (как и женственность самки) образуется под влиянием нормальной внутренней секреции половых органов, поэтому неправильное или недостаточное выражение полового типа нужно считать показателем ненормальной или слабой деятельности, что отражается и на продолжительности половой службы, и на проценте оплодотворения, на здоровье и жизнеспособности потомства, а у женских особей еще и на молочности и развитии материнских чувств».
Молодых животных для воспроизводства потомства следует использовать лишь после достижения ими физиологической зрелости, которая наступает у бычков и телок в возрасте 16-18 мес. и живой массе 330-350 кг. При спаривании недоразвитых телок с крупными быками возрастает число трудных отелов, а отходы телят при тяжелых родах во много раз выше, чем при нормальных.
Большое значение имеет отбор быков, так как эффективность селекции в скотоводстве на 70-75% зависит от племенной ценности производителя. Установлено, что если бык имеет низкую оплодотворяющую способность спермы (менее 70%), то рождается до 15-18% нежизнеспособных и слабых телят. Поэтому при выборе быка обращают внимание на его происхождение, общее развитие, здоровье. Нельзя использовать быков, давших ранее в потомстве крупных или мертворожденных телят. Благодаря применению искусственного осеменения, где отбор быков производится более тщательно, чем при естественном спаривании, возрастает число телят, родившихся живыми.
Очень важно чтобы ноги и копыта были здоровыми и крепкими. Намины и даже незначительные воспаления суставов ног могут сильно отразиться на способности быка оплодотворить закрепленных за ним коров и телок.
Наиболее важный физический признак самца-производителя — это форма, консистенция и размер мошонки, которые можно оценить при осмотре, пальпации и измерении. Установлено, что производители с маленькими, дряблыми семенниками дают мало спермы и она низкого качества. Для полуторагодовалого бычка нормальным считается обхват мошонки 32-34 см. Обхват мошонки — это точный показатель, который измеряют сантиметровой лентой в месте наибольшего диаметра, где лучше всего проступают семенники.
При отборе телок обращают внимание, прежде всего на их происхождение. Доказано, что чем более совершенно животное, тем менее тратится кормов, труда, денежных средств на его выращивание и получение продукции. Так, при удое 2500 кг корова затрачивает на 1 кг молока 1,3-1,35 корм.ед., а при удое 3500 кг- только 1,10-1,015 корм.ед., или на 15% меньше.
При отборе обращают внимание на крепость костяка, степень развития туловища, груди, тазового пояса, ног. Ни в коем случае не стоит оставлять телочку на племя из разнополых двоен — в 90% случаев она будет бесплодной.
После отбора на племя лучших мужских и женских особей составляют план подбора и принимают меры к его осуществлению. Подбор должен основываться на четком его определении цели и способов его достижения:
1. Превосходство производителей над матками, с которыми его намечают спаривать;
2. Наследственном закреплении в потомстве желательных качеств родительских особей и исправления их недостатков;
3. Регулирования родства между спариваемыми животными во избежание инбридинг-дипрессии;
Использования в последующем наиболее удачных сочетаний животных, при составлении родительских пар.
Чтобы не было уродливого потомства, следует избегать близкородственного спаривания животных. Несоблюдение этого условия приводит к появлению врожденного бесплодия: инфантилизма (недоразвитие половых органов), гермофродитизма, (животные с признаками мужского и женского пола), фриматизма (из разнополых двоен до 90 % телочек бывают бесплодными), крипторхизма (задержка одного или обоих семенников в брюшной полости).
Для получения крепкого жизнеспособного потомства необходимо учитывать основные законы возрастного подбора: к молодым самках следует закреплять производителей среднего возраста, к самкам среднего возраста — производителей молодых, среднего и старшего возраста и к самкам старшего возраста — производителей среднего возраста.
Бесцельные спаривания в надежде на случай или счастье успеха, как правило, не приносят.
Половая и физиологическая зрелость животных
Известно, что половая зрелость или способность к воспроизводству потомства, наступает у животных раньше, чем их можно осеменять. Это зависит от видовых и породных особенностей, от уровня и полноценности кормления, условий содержания и т.д. У телок и бычков она проявляется в возрасте 6-8 мес. Наступление половой зрелости не говорит о готовности организма к воспроизводству нормального потомства. У молодых самок недостаточно развиты многие органы, что неизбежно приводит к тяжелым родам, различным осложнениям, которые ведут к бесплодию.
Практикой животноводства установлены следующие оптимальные сроки случки животных: быков в возрасте 14-16 мес., телок — 16-18 мес.
Важным показателем готовности молодого животного воспроизвести нормальное потомство является живая масса. Она должна быть не ниже 70 % от живой массы взрослого животного, для телок 320-350 кг.
Слишком поздние случки животных нежелательны. Это ведет к увеличению затрат на выращивание, снижает их последующую продуктивность и воспроизводительную функцию. Так, по данным B.C. Шипилова (1986) увеличение возраста осеменения телок с 18 до 24 месяцев увеличивает затраты труда на 30,6%, а стоимость выращивания коров на 28,5%.
Направленное выращивание ремонтного молодняка, своевременное осеменение, а также правильная подготовка к родам — верный путь к созданию высокопродуктивных стад, отличающихся долголетием, высокой продуктивностью и плодовитостью.
Функции органов размножения самцов
Биологическая роль половых органов самцов заключается в образовании спермы и введении ее в половые органы самки. С наступлением половой зрелости у самцов в их семенниках (извитых канальцах) происходят сложные процессы формирования и развития сперматозоидов (спермиогенез). Продолжительность спермиогенеза (от начала деления сперматогоний до выведения зрелых спермиев) составляет 54 дня. Это необходимо учитывать при использовании быков в естественной случке или при искусственном осеменении.
Правильное, биологически полноценное кормление быков является основным методом воздействия на интенсивность их половой функции. Быков-производителей кормят по нормам с учетом их живой массы, возраста, состояния упитанности и режима использования. Особое внимание следует уделять обеспеченности животных белками, жирами, витаминами, минеральными веществами и т.д.
При неполноценном кормлении, чрезмерной половой нагрузке, ожирении или истощении образование и созревание спермиев нарушается. При этом снижается жизнеспособность спермиев, что может привести к импотенции самца или рождению от него мертвого или слабого потомства.
Образование спермиев в семенниках, их созревание и длительное хранение в придатках семенников (до двух месяцев) происходит при температуре на 3-4° ниже, чем температура тела. Пониженная температура и слабокислая реакция в хвосте придатка семенника тормозит подвижность, и обмен веществ, благодаря чему спермии находятся в состоянии анабиоза. Выключение хотя бы одного из этих условий ведет к быстрому прекращению жизни спермиев. Если в семенниках и придатках на несколько суток повысить температуру до 38-40°С, то спермии в придатках будут убиты. В семенных канальцах семенников прекратится образование новых спермиев и канальцы запустеют. Поэтому производителей необходимо содержать в чистых, сухих, хорошо вентилируемых помещениях, регулярно обеспечивать моционом, а в теплое время года купать или мыть. Следует знать, что навоз и грязь на мошонке действуют как согревающий компресс. Интересное приспособление (холодильник) изобретен в Японии для регулирования температуры семенников быков-производителей в летний период (Я. Астафьев, 1973).
Важным фактором в получении качественной спермы является режим использования производителя. При установлении режима использования учитывают возраст, индивидуальные особенности, запас спермиев в придатках семенников и количество выделяемых спермиев за одну садку. Запас спермиев в придатках семенников быков достигает 60-90 млрд. За один половой акт выделяется 4-5 млрд. (Н.И. Полянцев, В.В. Подберезный, 2001). Исходя из этого, от взрослых быков обычно получают сперму один раз через 3 дня дуплетной садкой с интервалом 5-7 минут. Молодым бычкам в возрасте до 18 месяцев допускают две садки в декаду.
Нарушение половой функции самцов проявляется в двух формах: в нарушении половых рефлексов, с полной или частичной потерей способности к половому акту и неспособности к оплодотворению вследствие патологических изменений спермы (азоспермия — отсутствие спермиев в эякуляте, оли-госпермия — малое количество половых клеток, тератоспермия — большое количество уродливых спермиев, некроспермия — мертвые половые клетки).
Причины импотенции такие же, как и бесплодие у самок. Она возникает вследствие недоразвития животных, нарушений условий кормления и содержания, патологии половых органов, неправильном использовании, а также вызывается искусственно, например, в результате травм половых желез. Кроме того, у самцов встречаются нарушения безусловных половых рефлексов в виде онанизма и гомосексуализма.
Онанизм — выделение спермы вне коитуса. Одна из главных причин онанирования — нерегулярное и редкое использование самцов, отсутствие активного моциона.
Гомосексуализм — половое извращение, состоящее в противоестественном половом влечении к особям своего же пола. Данный порок проявляется у самцов при задержке полового использования, скученном содержании, отсутствии моциона.
Половой цикл коров и телок
Функциональная деятельность воспроизводительной системы самок характеризуется ясно выраженной периодичностью, то есть протекает ритмично (циклично). Эти биологически важные, периодически повторяющиеся явления называются половым циклом. Средняя продолжительность полового цикла составляет у коров 21 день, у телок — 20 дней. В половом цикле различают три стадии: возбуждения (2-4 дня), торможения (1-3 дня) и уравновешивания (12-16 дней).
Стадия возбуждения характеризуется ярким проявлением всех сексуальных процессов — течки, полового возбуждения, охоты и овуляции.
Течка — это выделение слизи из половых органов самки. Начало течки можно обнаружить по выделению через половую щель небольшого количества слегка мутной полужидкой слизи, одновременно отмечаются слабая гиперемия (покраснение) слизистых оболочек половых путей, начало развития их отечности, расслабление шейки матки. Спустя сутки секреция слизи заметно возрастает, она выделяется в виде шнура, по цвету и консистенции напоминающего белок куриного яйца. Вульва и слизистые оболочки преддверия и влагалища сильно набухают, становятся ярко-красными. Влагалищная часть шейки матки увеличена, канал ее приоткрыт па 0,5-1 см. Во второй половине течки выделение слизи почти прекращается. Ослизнение половых путей в этот момент достигает максимума. В конце течки, которая совпадает со стадией торможения, эвакуация половой слизи вновь усиливается (фактор самоочищения половых путей), она становится густой, мажущей, мутной. У некоторых коров и телок в конце течки отмечаются метроррагии (маточное кровотечение). Это происходит из-за переполнения кровью кровеносных со-судов, расположенных в области курункулов, и разрыва их.
Выделение крови со слизью у коров после осеменения — явление физиологически нормальное, но количество крови может колебаться. У здоровых коров выделяется кровяная нить или сгусток. У коров с нарушенным обменом веществ выделяется алая кровь (в виде лужиц). Чем ближе по времени выделение крови к моменту осеменения, тем обычно лучше его результаты. Кровь, выделявшаяся через 2-3 суток после осеменения, свидетельствует о преждевременном осеменении.
Через 1-2 суток после начала течки проявляются признаки полового возбуждения. Корова становится более подвижной, оглядывается, не ложится, мычит или ревет, у некоторых животных заметно снижается удой и ухудшается аппетит. При свободном содержании корова активно перемещается, вскакивает на других самок, но на себя вскакивать не допускает.
Половая охота — положительная сексуальная реакция самки на самца или самку. При этом животное стоит спокойно («рефлекс неподвижности»). Охота наступает через 6-12 ч после того как у коровы появились признаки полового возбуждения, и длится 8-20 ч (чаще 12-18). Установлено, что у 60-70% коров охота начинается утром, у 10% — в полдень, у остальных (20-30%) – вечером и ночью.
Овуляция — процесс разрыва зрелого фолликула и выход из него яйцеклетки. Овуляция происходит через 10-12 ч после окончания охоты, чаще рано утром.
Наиболее благоприятное время осеменения — спустя 8-12 ч после начала охоты, то есть во второй ее половине. В этот период охоты в матке начинается всасывающий процесс (подобно вакуум-насосу).
До выхода яйцеклетки из фолликула спермии, находясь в половых путях самки, успевают пройти физиологическую подготовку (капацитацию), в процессе которой они становятся способными оплодотворить яйцеклетку.
На практике поступают следующим образом: если у коровы охота наступила в первой половине дня, ее осеменяют вечером; коров, проявивших признаки охоты вечером и ночью осеменяют на следующий день утром.
Методы выявления коров и телок в охоте
Выявление коров и телок в охоте и своевременное их осеменение – это решающие факторы получения высокой оплодотворяемости животных. Наиболее полно эти вопросы освещены в работах Н.Ф. Ключниковой (2003) и В.А. Середина (2004).
В настоящее время применяются следующие методы выявления коров и телок в охоте.
1. По внешним признакам.Корова, пришедшая в охоту, возбуждена, более подвижна, чем обычно. Пищевая доминанта тормозится, отмечается повышенная реакция на других коров. Заметно выражено стремление общаться с рядом стоящими особями. Животное тянется к обслуживающему персоналу, особенно к оператору по искусственному осеменению. Корова или совсем не дает молока или уменьшает его дачу, при этом оно становится более соленым и имеет даже горьковатый привкус. Корова в охоте стоит спокойно и допускает прыжки других животных на себя – у неё явно выражен признак «рефлекс неподвижности». В это время слизь из половых путей становится мутной и загустеваемой.
2. Методом группового контакта.Содержание скота на пастбище, активные прогулки зимой, моцион животных на выгульных площадках способствуют яркому проявлению половых рефлексов. При этом на корову в охоте запрыгивают другие коровы (не стельные и стельные).
3. Методом анамнеза – опроса обслуживающего персонала. Для выявления коров в охоте важное значение имеет число наблюдений за животными в течение суток и продолжительность одного наблюдения при трехкратных наблюдениях по 30 минут (в 8, 14 и в 21 час) выявляют 85 % животных, а по 15 минут – 65 %. При пятикратных выявлениях в течение суток процент пропусков охоты приближается к нулю. Особенно важно выявлять коров в охоте до утренней и после вечерней дойки. В это время половое возбуждение и рефлекс «неподвижности» проявляют 68 % животных.
4. Использование быков-пробников.Пробник – это специально оперированный производитель, у которого половой член отведен в сторону или другими способами нарушена функция выведения спермы. Самец – самый древний и сильный стимулятор половой функции самок. Однако использование пробников в скотоводстве весьма проблематично. Пробники, как и обычные производители, нуждаются в усиленном кормлении и хорошем уходе. Нельзя забывать о соблюдении техники безопасности. Как контролировать поведение огромного возбужденного зверя массой более 500 кг?
5. С помощью коров – выявительниц охоты.Выбракованных коров обрабатывают тестостероном пропионатом. (40 мг/мл в кукурузном масле) внутримышечно по 5 мл в течение 20 дней, а затем 1 раз в две недели вводят 500 мл тестостерона пропионата. Такие животные работают как быки, выбирая коров в охоте.
6. Мечение коров мелом. –если метка размазана и волосяной покров взъерошен, считают, что корова пришла в охоту. Этот метод применяется на некоторых фермах в США.
7. Применение детекторов охоты.Детектор охоты КаМАР состоит из заполненной красной жидкостью капсулы, которая прикреплена к ткани, имеющей губчатое строение. Его прикрепляют на крестец коровы и когда на корову в охоте прыгают другие животные, то тяжестью тела давят на капсулу. Если это давление продолжается около 8 секунд, то краска выливается из капсулы и окрашивает губку в красный цвет. Оригинальные конструкции детекторов охоты в нашей стране предложены Ю. Максимовым (1977); В.И. Державцевым и В.П. Белоус (1983); А. Спиваковым и В. Войтенко (1984).
8. Мечение крупа коров специальными красками.Краски яркие: светло-розовые, светло-зеленые, светло-голубые. Из аэрозольного баллончика окрашивают полоску волос 520 см в области крупа. Краска сохраняется на животных до трех недель. Дважды в день во время доения животных осматривают. При наличии взъерошенных волос на окрашенной полосе судят о наличии рефлекса неподвижности. Ошибка такого способа выявления охоты – 8 %. Этот способ хорошо зарекомендовал себя на крупных фермах Новой Зеландии. По эффективности он не уступает хорошо организованному выявлению охоты с помощью быка – пробника, является более удобным и менее трудоемким.
9. Инструментальный метод.В 1961 году в нашей стране предложен электрический метод определения пригодности коров для осеменения. В основе его измерения электропроводимости слизистой оболочки преддверия влагалища в период течки. Сопротивление в межтечковый период более 450 Ом. Затем оно снижается до 300 Ом во время течки, а после овуляции вновь повышается. Разработаны приборы «Эстрометр -2», «Охотник» и др.
10. По содержанию прогестерона в молоке.В последние годы все большее распространение получает лабораторное исследование молока с целью уточнения осеменения. Для этого образцы молока собирают ежедневно, начиная с 18 дня после последней охоты в течение 3-4 дней до заметного снижения концентрации прогестирона. Осеменение проводят в течение следующих 24 ч.
11. По температуре молока.Для этого монтируется датчик электронного измерения в коллектор доильного аппарата или прямо в доильные стаканы. По данным Н.Ф. Ключниковой (2003), во всех случаях измерения температуры молока у коров в «охоте» величина его была выше нормы на 0,8-1,00С.
12. Использование телевидения.Круглосуточное наблюдение за поведением коров с помощью телевизионной системы – несомненное достоинство этого метода. Однако его применение затрудняет дороговизна оборудования и невозможность использования на пастбище.
13. Применение собак.Метод основан на выявлении коров в охоте по запахам феромонов.
Косвенным показателем точности отбора коров для осеменения может служить кровотечение из половых органов после осеменения. Выделение крови до 24 ч и после 72 ч свидетельствует о безрезультативности осеменения.
Факторы, влияющие на оплодотворение
Оплодотворение — сложный процесс взаимодействия спермиев и яйцеклетки, в результате которого образуется качественно новая клетка — зигота (в переводе с греческого — упряжка из двух быков), способная к реализации заложенной в ней генетической программы.
Долгое время человек не мог раскрыть тайны этого процесса. Так, еще в XVIII веке существовало два мнения. Сторонники одного из них (преформисты) считали, что все части зародыша находятся в готовом виде в яйцеклетке. Сторонники другого направления (аминкулисты) были убеждены в том, что все части зародыша «упакованы» в спермии. Один из представителей этого направления Николай Андре утверждал, что врожденные уродства не что иное, как результат повреждений, полученных спермиями в схватке с соперниками. Бурное развитие биологии на рубеже XIX-XX вв. показало, что обе стороны были неправы.
Оплодотворяемость зависит от многих факторов: породы, возраста, упитанности животных, размера стада, системы содержания, уровня продуктивности, сезона года, биологического качества яйцеклеток и спермиев, условий проведения случки или искусственного осеменения, состояния половых путей и т.д.
Наличие породных различий по оплодотворяемости можно видеть из анализа результатов осеменения коров в хозяйствах Кубы — голштинская порода — 45,5%, швицкая — 64,9%, зебу — 61,3% (Цит. по Н.И. Полянцеву и В.А. Калашнику, 1991).
Наивысшая оплодотворяемость отмечается у телок (80%) и у коров 3-4 — летнего возраста (60-70%).
Лучших результатов осеменения достигают при осеменении животных, находящихся в состоянии средней или выше средней (заводской) упитанности. Как ожирение, так и исхудание снижает этот показатель воспроизводства стада.
С увеличением размера стада оплодотворяемость коров снижается, так как меньше уделяется времени отдельным животным, возрастает воздействие стресс-факторов. При пастбищном содержании дойного стада оплодотворяемость выше, чем при стойловом.
Высокая продуктивность затрудняет оплодотворение коров особенно в первые 2 месяца после отела.
В первый месяц после отела половые пути коровы еще недостаточно подготовлены к осуществлению функций размножения, поэтому оплодотво-ряемость не превышает 20-30%, на втором-третьем месяцах она возрастает до 60-70%.
Наиболее благоприятное время для осеменения самок — весна и осень. Самая низкая оплодотворяемость отмечается зимой.
Большое влияние на оплодотворяемость оказывает генотип. По оплодо-творяющей способности быков-производителей можно разделить на три группы: низкоплодовитые, (51-60%), среднеплодовитые (61-70%) и высокоплодовитые (свыше 70%). В США комплектование центров по искусственному осеменению ремонтными бычками с учетом результатов их оценки по оплодотворяющей способности спермы позволило за сравнительно короткий срок поднять уровень оплодотворяемости до 65-72%.
При выборе времени осеменения следует учитывать физиологические сроки сохранения биологической полноценности спермиев и яйцеклеток. Так, спермии быка сохраняют оплодотворяющую способность в течение 24-48 ч, яйцеклетка живет не более 8 ч.
Оплодотворяемость у коров и телок снижается при принудительной доставке к месту осеменения, грубом обращении (окрики, побои). Физиологический механизм нарушений процесса оплодотворения в этом случае сводится к следующему: стресс-факторы тормозят предовуляторный выброс в кровь лютеинизирующего гормона, что обуславливает задержку овуляции. Под влиянием болевых ощущений и страха выделяется гормон надпочечников -зпинефрин, который вызывает спазм половых путей и выброс введенной спермы (Д.А.Устиноа,1976).
Работы немецких ученых показали, что побои, нанесенные животному утром, снижают вероятность оплодотворения, если даже осеменение проведено после полудня.
Большое влияние на оплодотворение оказывает общее состояние организма самок. Животные низкой упитанности, изнуренные лактационной деятельностью, как правило, плохо оплодотворяются. Проникновение в организм самки некоторых веществ (мышьяк, ртуть, коллоидальное серебро, железо, свинец, никотин, фосфор) снижает этот показатель. По данным А.С. Студенцова (1970) введение в организм желтого фосфора, свинца, никотина не только снижает оплодотворяемость, но и в 50% случаев вызывает аборт.
СТИМУЛЯЦИЯ ПОЛОВОЙ ФУНКЦИИ ЖИВОТНЫХ
Приемы, стимулирующие половую активность быков
Для стимуляции воспроизводительной способности самцов применяют массаж семенников. Массаж нужно проводить ежедневно, после предварительного обмывания мошонки водой комнатной температуры. Массируют, разминают и поглаживают. Быкам массаж проводят за 5 минут до садки в течение 5-10 минут. Массаж возбуждает лимфатический и венозный тонус, рефлекторно вызывает повышение кровяного давления и усиливает приток крови к органам: половая функция активизируется, в результате увеличивается количество и улучшается качество спермы.
Особенно хороший результат массаж семенников дает у молодых, впервые назначенных для случки животных. Нельзя применять массаж при воспалительных процессах в семенниках.
Половое возбуждение у быков можно усилить, выдерживая их около животного перед садкой в течение 5 минут и предоставляя им несколько холостых прыжков (без выделения спермы), что повышает количественные и качественные показатели спермы.
На Дальнем Востоке в целях повышения половой активности и спермо-продукции быков рекомендуется использовать растительные стимуляторы: лимонник из семейства магнолиевых и элеутерококк колючий из семейства аралиевых.
Препарат лимонника скармливают производителям в течение 15 дней. Готовится он следующим образом. Собранные осенью ягоды размалывают вместе с косточками. Полученная мука скармливается ежедневно быку живой массой 900 кг по 30 г в сутки вместе с концентрированными мучными кормами.
Препарат элеутерококка колючего готовится следующим образом. Собранные осенью корни растения высушиваются и размалываются на мельнице. Перед скармливанием мука заливается кипятком. Это улучшает экстракцию действующего начала растения — элеутерозидов. Препарат скармливается вместе с концентратами из расчета 30 г муки в сутки на быка живой массой 900 кг в течение 15-20 дней. В опытах, проведенных на Хабаровской и Приморской станциях по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, спермопродукция быков-производителей, получавших элеутерококк, возрастала на 50 % (Ю.Л. Максимов, 1965, В.И. Коровко, 1973).
Методы повышения половой активности и борьбы с перегулами коров
Бесплодие коров проявляется в двух формах:
1. Корова не проявляет половой активности (охоты и течки) и ее не осеменяют.
2. Корова приходит в охоту, осеменение производится, но оплодотворение не наступает, т.е. корова перегуливает.
В зависимости от формы проявления бесплодия применяются различные методы стимуляции половой активности. Стимуляцию следует проводить не ранее чем через 45 дней после отела, то есть когда половые органы полностью восстановят свои функции (Н.И. Полянцев, В.А. Калашник, 1991).
Наиболее сильными стимуляторами воспроизводительной функции является правильное кормление, содержание животных в сочетании с активным моционом и использованием быков-пробников.
В том случае, если корова не приходит в охоту необходимо применять следующие мероприятия:
1. Делать ректальный массаж матки и яичников в течение 2-3 мин с интервалом в 2-3 дня.
2. Смазывать шейку матки слабой 2% настойкой йода (ватка увлажняется настойкой йода и зажимается в корнцанг, смазывание производится через влагалищное зеркало).
3. Промывать влагалище стерильным 1% раствором поваренной соли с температурой 43-44°С из кружки Эсмарха.
4. Применять молозиво. Оно содержит эстрогены, которые, попав в гипофиз, вызывают выделение фолликулостимулирующего гормона. Молозиво берут со второго удоя от благополучно растелившихся коров, добавляя на 1 литр 1 000 000 ИЕ антибиотиков, и вводят на 20-30 мл в верхнюю треть шеи подкожно.
5. Для стимуляции охоты и профилактики послеродовых заболеваний органов размножения коров рекомендуется выпаивать собственное молозиво в количестве 1 литра (М.Т. Ключников и др., 2000).
6. Скармливать измельченные корни элеутерококка по 30-40 г в сутки с комбикормом в течение 10 дней.
7. Временно включить в рацион коров, не приходящих в охоту, 10-15 кг свеклы или 500 г сахара.
В случае если корова приходит в охоту, осеменяется, но не становится стельной необходимо применять следующие технологические приемы:
1. Производить массаж матки через прямую кишку за 5-7 мин до осеменения для усиления действия окситоцина.
2. Орошать влагалище 10% раствором сахара или 2% раствором двууглекислой (пищевой) соды. Объем раствора — 0,5 л, температура 38-39°С вводится во влагалище из кружки Эсмарха за 15 мин до осеменения.
3. Вводить раствор окситоцина. Вводится цервикально (в шейку матки) за 1-2 мин до осеменения в количестве 3 мл (15 ЕД) один раз в течение охоты.
4. Осеменять коров перед дойкой или через 2-4 часа после дойки.
5. Заменять сперму одного быка (в случае повторной охоты) спермой другого той же линии с целью предупреждения иммунного бесплодия.
6. Вводить подкожно перегуливающим коровам витамин А или каротин в количестве 30-50 тыс. ЕД.
7. Скармливать коровам препарат из корней или листьев элеутерококка. Размол (30 г) заливают кипятком (1:5), выдерживают 30 мин и скармливают в течение 15-20 дней.
ЕСТЕСТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ КОРОВ И ТЕЛОК
Естественное осеменение происходит при половом акте, т.е. при непосредственном контакте самца и самки, когда проявляется весь комплекс половых рефлексов, характерных для спаривания. Основными способами естественного осеменения (спаривания или случки) в скотоводстве являются вольная и ручная.
При вольной случке производитель постоянно находится вместе с самками и покрывает их по мере того, как они приходят в охоту. На одного быка подбирают 35-40 коров или телок за сезон. Только при такой низкой нагрузке на быка-производителя можно рассчитывать на получение здорового потомства.
Вольная случка приводит к быстрому изнашиванию производителей и частой их смене. По данным американских исследователей, если быка поместить в один загон с 10-25 телками в состоянии охоты, то бык сделает в среднем 245 садок за 96 часов (Г. Миниш, Д. Фокс, 1986).
В случае использования в одном стаде нескольких производителей одновременно, что часто бывает при таком способе случки, невозможно точно вести учет происхождения приплода и осуществлять целенаправленный подбор пар животных.
При вольной случке значительно увеличивается возможность распространения заразных болезней (бруцеллез, туберкулез, вибриоз, лептоспироз, трихомоноз и др.). Поэтому, за исключением табунно-пастбищного содержания лошадей, распространенного в отдельных зонах страны, применение вольной случки свидетельствует о низком уровне зоотехнической работы в животноводстве.
При ручной случке производителя содержат отдельно от самок. Спаривание животных происходит под наблюдением персонала. Она дает возможность: подбирать маток по намеченному плану и в определенные сроки; регулировать половую нагрузку на производителя; предупреждать появление и распространение инфекционных заболеваний; проверять готовность самки к осеменению; учитывать приплод от родителей.
Случку проводят в загоне, выгульном дворике или манеже. Во избежание травм при покрытии телок крупными быками используют специальные станки. Неспокойных животных фиксируют, иначе возможны травмы половых органов, как самцов, так и самок.
При ручной случке за быком закрепляют 60-100 коров или телок. Осеменение животных проводят дважды в одну охоту: первый раз — сразу после выявления у них охоты и второй раз — через 10-12 ч, если охота продолжается.
При ручной случке следует по возможности ограничиваться одной садкой, которой в большинстве случаев бывает достаточно для оплодотворения. При первой садке выделяется спермы по объему и по количеству клеток значительно больше, чем требуется для одной самки. При повторных садках, следующих одна за другой, у быков-производителей уменьшается количество и качество спермы, что снижает вероятность оплодотворения других коров и телок.
В хозяйствах для организации и проведения естественного осеменения нужны пункты осеменения. На каждом пункте необходимо иметь помещение для содержания производителей, кормов и инвентаря. Комнату для специалиста по воспроизводству животных, где могут храниться необходимые материалы и инструменты (халаты, полотенца, вата, бинты, дезинфицирующие растворы, влагалищные зеркала, микроскоп и другие принадлежности). Обширный двор с загоном, коновязью и станком для осеменения. Помещения должны содержаться в чистоте и периодически подвергаться дезинфекции, побелке или окраске.
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ
Краткая история развития и преимущества метода
Тайна зарождения живых существ с древнейших времен волновала человеческие умы. Существует легенда о том, что за 800 лет до н.э. ассирийцы вводили губку во влагалище кобылы и после коитуса с жеребцом переносили эту губку со спермой во влагалище другой кобылы для получения высококачественного потомства.
В арабской летописи отмечается, что в 286 г. новой эры один бедуин из Северной Африки, не имея возможности получить приплод от жеребца, принадлежащего его сопернику, ввел во влагалище одной из кобыл, пасшихся с этим жеребцом, пучок конских волос. Затем извлек его после коитуса, быстро перевез и ввел во влагалище своей кобылы и таким образом искусственно осеменил ее.
Как физиологический опыт искусственное осеменение впервые применили в 1763 г. Стефан Якоби на рыбах, а в 1780-1782 гг. Ладзаро Спалланца-ни и П.Росси — на собаках. Однако производственное значение в животноводстве этот метод приобрел только в результате творческой деятельности нашего выдающегося соотечественника И.И. Иванова. Он заложил теоретические основы и принципы почти всех существующих приемов искусственного осеменения животных. Современные методы получения, оценки, разбавления, сохранения спермы и введения ее в половые пути самок по существу являются усовершенствованием и развитием тех методов, которые впервые применил И.И. Иванов. Своими работами он заслуженно завоевал мировую известность и его имя останется в веках как автора самого крупного открытия в истории животноводства. Так, используя искусственное осеменение, от одного барана получили 18414 ягнят и от одного быка 42 тыс. телят в год.
Искусственное осеменение животных позволяет быстро выводить новые и улучшать существующие породы животных. В нашей стране за короткий период выведены 12 новых высокопродуктивных пород крупного рогатого скота (черно-пестрая, сычевская костромская, курганская и др.).
Семенем быка улучшателя швицкой породы по кличке Джей в 1984 г. было осеменено 20 тыс. коров и от полученных от него дочерей было надоено в среднем на 547 кг молока больше, чем от их сверстниц. Животноводам Дании, благодаря использованию искусственного осеменения и хорошей организации племенной работы удалось за 25 лет повысить удои коров с 4000 до 6500 кг, при средней жирности молока 4,2%.
Искусственное осеменение животных предупреждает распространение инфекционных заболеваний, которые передаются при естественном спаривании, поскольку используется стерильный или одноразовый инструмент.
Этот метод позволяет вести эффективную борьбу с бесплодием потому, что с помощью специальных приборов или пальпацией определяют аномалии воспроизводительной функции животных и принимают меры к их устранению.
Ни одно открытие в животноводстве (механическое доение, уборка навоза, раздача кормов и т.д.) не может сравниться по экономической эффективности с этим методом. Поскольку значительно сокращаются потребности в производителях, сокращаются затраты на корма, помещения, человеческий труд.
Надо также учитывать то, что быки-производители — это, как правило, крупные, сильные, агрессивные животные, которые представляют опасность для здоровья и жизни человека. В 1965 г. погиб под рогами быка гл. зоотехник Черниговской станции искусственного осеменения. А ведь это был знающий специалист, который более 20 лет работал с такими животными. Он допустил маленькую ошибку: надел новый бушлат (новый запах) и вошел в станок к своему любимому быку по кличке Фараон, который мгновенно прижал его к стенке станка. Через 2 месяца этот человек умер.
Внедрять искусственное осеменение в скотоводстве начали с 1930 г. В 1932-1933 гг. выдающийся генетик А.С. Серебровский выдвинул идею организации специальных станций, на которых должны быть сосредоточены ценные производители, чью сперму можно широко и планомерно использовать во многих стадах разных районов страны. В 1955-1956 гг. в нашей стране начали создаваться крупные государственные станции по племенной работе и искусственному осеменению. Это позволило расширить масштабы применения метода, повысило его экономическую эффективность и способствовало дальнейшему развитию научных исследований в области воспроизводства животных. Особенно большую роль сыграла разработка способа длительного хранения спермы в глубоко замороженном состоянии (при -196°С) И.В. Смирнов, В.К. Милованов и И.И. Соколовская (1948-1951 гг.).
В настоящее время искусственное осеменение стало самым эффективным биотехнологическим способом воспроизводства животных. В мире в отдельные годы осеменяют до 100 млн. молочных коров, 50 млн. овец, 6 млн. свиней. В 1989 г. в СССР было осеменено 35 млн. коров и телок (87%). В ряде стран (Дания, Голландия, Япония, Израиль, Финляндия и др.) почти всех коров осеменяют искусственно.
Получение спермы от быков
Получение спермы от производителей — важнейшая часть технологии искусственного осеменения сельскохозяйственных животных.
Все методы получения спермы подразделяются на хирургические, влагалищные и уретральные.
Хирургический методзаключается в извлечении спермиев из придатков семенников убитого самца или после его кастрации. Этот метод разработал И.И. Иванов. Отпрепарированные придатки семенников измельчают, вымывают из них разбавителем половые клетки и этой смесью осеменяют самок. Таким путем получили сперму от диких баранов — архаров и вывели новую породу — архаромеринос.
Влагалищные методызаключаются в извлечении спермы из влагалища самки после спаривания с производителем при помощи влагалищного зеркала и специальной ложки или посредством губки. Губочный метод был доведен до совершенства И.И. Ивановым. Хорошо обработанную, чистую, про-стерелизованную греческую губку вводят корнцангом во влагалище коровы и дают возможность производителю покрыть ее. После этого губку извлекают и выжимают из нее сперму рукой или специальным прессом. При применении влагалищных методов получения спермы отмечаются большие потери спермы и загрязнение ее влагалищным секретом и микроорганизмами, а при отжатии губки часть половых клеток повреждается. К недостаткам методов относится также возможность переноса заразных болезней.
К уретральным методамотносят массаж ампул спермиопроводов, фистульный, электроэякуляции, спермособирателя и искусственной вагины.
Метод массажа.Известно, что во время полового возбуждения спермии из канала придатка семенника перемещаются в ампулы спермиопроводов и сохраняются там до момента эякуляции. Массажем можно вызвать сокращение ампул и выделение половых клеток наружу. Впервые массаж половых протоков с целью получения спермы от быка применил Г. Кэйз в 1925 г. В последующем Ф. Миллер и Е. Эвэнс (1934) описали метод массажа ампул спермопроводов через прямую кишку.
Быка перед получением спермы выдерживают перед самкой или другим самцом (сексуальная стимуляция). Затем руку вводят в прямую кишку на глубину 25-35 см, при необходимости освобождая ее от каловых масс, находят твердый червеобразный орган — мочеполовой канал и, двигая по нему рукой вперед, отыскивают мягкую шейку мочевого пузыря с лежащими на ней ампулами спермиопроводов в виде эластичных трубок толщиной с палец, а по бокам от них — грушевидные пузырьковидные железы. Производят осторожный массаж желез спереди назад и таким же образом массируют ампулы спермиопроводов. Обычно 2-минутного массажа бывает достаточно для того, чтобы выделилась сперма. Сперму собирает помощник в спермоприемник, подставленный к отверстию препуция.
Этим методом можно воспользоваться для получения спермы от тех быков, которые по какой-либо причине (слабые или больные задние конечности, слишком вялое проявление половых рефлексов и др.) не в состоянии эякулировать в искусственную вагину или идти в случку.
Фистульный метод. Впервые промежностную уретростомию для получения спермы быков применил И.В. Глумаков. Этим методом сперму получают во время естественной садки производителя из фистулы мочеполового канала. В научных целях применяется наложение фистул на спермиопрово-ды, канал придатка семенника, другие участки внутренних половых протоков.
Метод электроэякуляции. Этот метод впервые был применен для получения спермы от быков в 1943 г. Метод основан на том, что под воздействием слабого электрического тока происходит возбуждение центра эякуляции, а также нервов и мышц, участвующих в процессе извержения спермы.
Прибор для электроэякуляции состоит из биполярного электрода и источника тока переменного напряжения (от 0 до 30 V) малой силы (0,5 — 1 А ). Биполярный электрод представляет собой каучуковый стержень с вмонтированными электродами (двумя положительными и двумя отрицательными) в виде колец, расположенных на расстоянии 4 см друг от друга. Биполярный электрод вставляют в прямую кишку (перед этим удаляют фекалии) так, чтобы кольца находились в области придаточных половых желез. Делая периодически электрические стимулы продолжительностью 3-5 с, вызывают выделение спермы. Эякуляция у быков наступает после 3-5 периодов подачи тока. Сперму собирают как при массаже ампул спермиопроводов и в тех же случаях нарушения половой функции производителей.
Метод спермособирателя. Спермособиратель представляет собой трубку из тонкой резины, один конец которой полностью закрыт, а свободный растянут на жестком широком кольце. Эти приборы были сконструированы А.А. Зальцманом, В.К. Миловановым и И.М. Родиным. Несмотря на жесткие расширяющие кольца, спермособиратели в момент совокупления могут вдавливаться во влагалище, а иногда они просто разрываются. В связи с этим получение спермы этим методом не нашло широкого применения.
Метод искусственной вагины. Впервые прибор с названием искусственная вагина был предложен итальянцем Дж. Амантеа в 1913 г. для получения спермы от собаки. Искусственную вагину для быка создали И.М. Родин, Н.А. Комиссаров, В.И. Липатов в 1932 г. Поэтому в литературе многих стран получение спермы при помощи искусственной вагины называли русским методом. Это открытие имело исключительно важное значение для развития искусственного осеменения, так как почти разрешил чрезвычайно трудную технологическую задачу получения спермы от самцов.
Искусственная вагина состоит из наружного (эбонитового, резинового, металлического) и внутреннего цилиндра или трубки — эластичной гладкой резиновой камеры, которую надевают на наружный цилиндр. В наружном цилиндре имеется патрубок с отверстием, через которое в межстенную полость (между корпусом и резиновой камерой) наливают теплую воду (100 мл) и нагнетают воздух. Для нормальной эякуляции быка необходима температура 41-42°С и давление 40-60 мм рт.ст. На одном конце наружного цилиндра фиксируют спермоприемник. В настоящее время спермоприемником служит одноразовый полиэтиленовый пакет конической формы, заключенный в термостатический чехол. После получения спермы концевую часть одноразового спермоприемника отделяют и герметизируют для дальнейшей работы со спермой.
Физиология и биохимия спермы
Состав спермы.Сперма состоит из двух частей различного происхождения: спермиев, образовавшихся в семеннике и созревших в придатке семенника и плазмы, являющейся смесью секретов придаточных половых желез. Спермии — главная часть спермы. В них заложена наследственная основа в виде молекулы ДНК. Однако и плазма играет важную роль, так как содержит различные химические вещества и соединения, обеспечивающие изотоничность, буферность, а также соответствующее осмотическое давление и рН.
Сперма содержит 85-97% воды и 3-15% сухих веществ. Сухой остаток на 9% состоит из белков и липидов. В сперме широко представлены биологически активные вещества: ферменты (кислая и щелочная фосфатаза, гиалу-ронизада, гликозидаза, амилаза, липаза, протеазы, оксидазы и др.), антиаглю-тинины, простаглапдины, гормоны (апдрогены и эстрогены).
В сухом веществе спермы около 1% золы. Зольная часть содержит фосфор, кальций, магний, калий, натрий, хлор, цинк, железо, медь и ряд других элементов.
Строение спермиев. У быка спермии составляют от 12 до 20% объема эякулята. Спермий состоит из головки, шейки, тела и хвоста. Головка содержит наследственное вещество — дезоксирибонуклеиновую кислоту, передающую потомству свойства родителей. Шейка, тело и хвост — двигательные части спермия. Длина спермиев быка равна 65-72 микрометрам (микрометр равен 0,001 мм). Длина головки — 9, шейки — 1, тела — 10-13 и хвоста — 44-53 мкм (микрометров). У спермиев быка на головку приходится 51% общей массы, на шейку + тело — 16, на хвост — 33%. По объему сперматозоид быка в 20 тыс. раз меньше яйцеклетки коровы.
Химический состав спермы. Спермии содержат около 25% сухого вещества и 75% воды. Из сухого вещества 85% приходится на белки, 13,2% на ли-пиды и 1,8% — на минеральные вещества. В спермиях имеется также значительное количество фосфора (около 2,7%), а в головке содержание его доходит до 4%. Головки спермиев содержат много нуклеиновых кислот, а хвосты — липиды и разнообразные ферменты, активно участвующие в жизненных процессах спермия.
В спермиях находятся следующие минеральные вещества: натрий, магний, калий, кальций в виде солей фосфорной, хлористоводородной и серной кислот, а также в виде солей органических кислот.
Оболочка, одевающая спермий, имеет белковое происхождение и содержит большое количество цистина и является таким же белковым образованием, как и кератин кожи. Белок, содержащий серу, придает оболочке спермия прочность.
Виды движения спермиев. Способность двигаться — важное биологическое свойство спермиев, которое необходимо для достижения ими места оплодотворения и проникновения в глубь яйцеклетки. Центр движения находится в шейке и теле спермия. При отрывании хвоста от тела, спермий становится неподвижным, тогда как спермии без головки могут продолжать двигаться.
Имеется несколько видов движения спермиев: прямолинейно-поступательное (спермии активно перемещаются вперед по прямой линии), манежное (спермии вращаются вокруг своей головки или перемещаются по кругу с радиусом, равным примерно длине спермия), колебательное (спермии на одном месте изгибаются вправо и влево). Прямолинейно-поступательное движение спермиев является нормальным, а манежное и колебательное относится к анормальным.
Движение спермиев осуществляется при помощи хвоста. Он изгибается в одну сторону, а затем быстро выпрямляется. Такое движение хвоста быстро повторяется одно за другим. В результате отталкивания его от жидкости, в которой он находится, спермий продвигается вперед. В одну секунду хвост спермия быка при +37°С производит 9 ударов. Ложкообразная форма головки спермия при односторонних движениях хвоста обеспечивает вращение его вокруг своей продольной оси. Сочетание ударов хвоста с вращением вокруг оси приводит к прямолинейному поступательному движению спермия. Скорость движения спермиев быка около 5,6 мм/мин.
Нормальные спермии в медленно текущем потоке двигаются в одном направлении — против тока жидкости. Эта особенность называется реотаксисом. Благодаря реотаксису спермии в яйцеводе двигаются навстречу с яйцеклеткой. В то же время неподвижные и мертвые спермии перемещаются вместе с током жидкости.
Все нормальные спермии имеют отрицательный электрический заряд. Наличие одноименного электрического заряда отталкивает спермиев друг от друга. Поэтому в густой сперме не происходит их столкновения или слипания. Под влиянием электрического заряда спермии располагаются параллельно друг другу, что создает определенный порядок в их движении.
При снижении электрического заряда взаимное отталкивание спермиев ослабевает, и они агглютинируют, т.е. слипаются головками или всеми частями. Агглютинация может быть от разных причин: при увеличении кислотности спермы, при наличии в нем ионов металлов (кальция, магния, алюминия), которые ослабляют или полностью снижают отрицательный электрический заряд спермиев. Склеивание может быть также при наличии агглютининов — особых веществ, появляющихся при иммунизации организма самки чужеродными белками. Сперма с агглютинированными спермиями — показатель низкого качества, так как такие спермии не способны продвигаться в половых путях самки для встречи с яйцеклеткой.
Влияние на спермиев внешних факторов. После получения (извлечения из организма самца) спермии подвергаются воздействию факторов окружающей среды.
Действие света. Прямые солнечные лучи возбуждают движение спермиев, но быстро убивают их (за 20-40 мин). Неблагоприятен и сильный электрический свет. Рассеянный свет не оказывает вредного воздействия. Следовательно, и в процессе получения, разбавления и использования, сперму надо оберегать от прямого воздействия солнечного света.
Действие температуры. Жизнеспособность спермиев вне организма зависит от температуры жидкости, в которой они находятся. Наиболее подвижны спермии при температуре близкой к температуре тела животного (+37-390 С). При температуре 450С спермии утрачивают свою оплодотворяющую способность вследствие инактивации ферментных систем, а при температуре 48°С они погибают.
При температуре ниже, чем температура тела животных, движение спермиев замедляется. При постепенном охлаждении спермы до температуры около 00 С движение спермиев прекращается и они переходят в состояние анабиоза (неподвижное состояние спермиев, при котором они сохраняют жизнеспособность). При подогревании спермы до температуры 37-390С подвижность их восстанавливается. При низких температурах спермии сохраняют жизнеспособность длительное время. Поэтому большинство методов хранения спермы связано с его охлаждением.
Однако резкое охлаждение спермы вызывает температурный шок или холодовой удар — гибель спермиев или их повреждение с потерей оплодотворяющей способности. Температурный шок наиболее сильно проявляется при быстром понижении температуры спермы — ниже 180 С. Наиболее чувствительна к понижению температуры свежеполученная сперма. После выдержки спермы при комнатной температуре в течение 1-2 ч она становится менее чувствительна к быстрому понижению температуры. Чтобы избежать гибели спермиев от холодового удара, необходимо все работы со спермой проводить при температуре не ниже 180С.
Осмотическое давление. Спермии очень чувствительны к изменению осмотического давления, т.е. концентрации веществ в жидкости, в которой они находятся. Осмотическое давление в жидкости должно быть равным внутреннему осматическому давлению спермиев. Если спермии поместить в гипотонический раствор или в обыкновенную воду, они быстро погибнут вследствие повышения внутреннего давления. Под влиянием гипотонического раствора хвостики спермиев набухают и закручиваются кольцом или полукольцом.
Если сперму смешать с гипертоническим раствором (например, 3%-й раствор хлористого натрия), спермии тоже погибнут, но уже от обезвоживания. Они сморщиваются, их хвостики приобретают зигзаговидную форму.
Исходя из этого, среда для разбавления спермы, а также рабочие растворы должны быть изотоничными сперме. К ним следует отнести 1%-й раствор хлористого натрия, 1%-й раствор двууглекислой соды, 2,9%-й раствор натрия цитрата, 6,4%-й раствор глюкозы.
Кислотность среды. Все клеточные процессы в сперме происходят нормально только при определенных концентрациях водородных ионов (рН) среды. Свежеполученная сперма быка имеет нейтральную, или близкую к нейтральной (рН 6,7-7.0).
Накопление водородных ионов тормозит процессы жизнедеятельности спермиев. При рН 6,3-6,4 наступает кислотный анабиоз. Дальнейшее увеличение кислотности вызывает гибель спермиев.
Сдвиг рН в щелочную сторону вначале активизирует спермии, но при рН 7,8-8,0 наступает их гибель.
Цельная сперма быка способна противостоять изменениям рН среды благодаря наличию в ее составе солей слабых кислот-карбонатов, фосфати-тов, цитратов. Это свойство называется буферностью. Буферность играет большую роль в обеспечении жизнедеятельности спермиев, предохраняя их от повреждений, связанных с резким изменением среды.
Действие солей. Большое влияние на жизнедеятельность спермиев оказывают растворы солей электролитов, т.е. растворы, проводящие электрический ток.
В придатке семенника солей содержится в 10 раз меньше, чем в свеже-полученной сперме, поэтому спермии там могут храниться длительное время (до 2-х месяцев). При эякуляции концентрация солей в плазме повышается, а они действуют возбуждающе на спермиев, что сокращает срок их жизни.
Электролиты состоят из катионов и анионов. Одно- и двухвалентные катионы существенно не изменяют выживаемость спермиев.
Анионы оказывают более сильное влияние, чем катионы, причем действие анионов зависит от валентности. Анионы хлоридов разрыхляют оболочку спермиев и разрушают липопротеидный покров, что ведет к гибели спермиев. Так, по данным М.В. Поповой, в сперме жеребца содержится 476 мг % хлоридов, а в семени баранов их всего 47 мг %. Этим можно объяснить низкую переживаемость спермиев жеребца вне организма (менее одних суток), тогда как спермии быка и барана могут жить вне организма 3-7 и более суток. Анионы фосфатов, сульфатов, цитратов, наоборот уплотняют оболочку спермиев и стабилизируют электрический потенциал. В связи с этим соли фосфорной, серной, лимонной кислот используются в составе сред для разбавления спермы.
Влияние сахаров. В противоположность солевым растворам на жизнеспособность спермиев благоприятно действуют растворы различных сахаров, особенно фруктозы. Добавление сахарных растворов (фруктозы, глюкозы, сахарозы, лактозы и др.) в определенных концентрациях устраняют возбуждающее действие хлористых солей на спермиев, что увеличивает срок их жизни.
Влияние химических веществ и медикаментов. Большинство химических соединений токсичны для спермиев. Этим следует объяснить неудачи искусственного осеменения животных, когда его проводят в ветеринарных лечебницах, амбулаториях, или когда используют те же инструменты, которые применяют во время лечебной работы.
Установлено, что спермиев быстро убивают сулема в дозе 0,000003 г, марганцевокислый калий в дозе 0,00004 г, лизол, креолин, уксусная кислота в дозе 0,0003 г на 1 г спермы (А.П.Студенцов и др., 1986). Щелочи и кислоты, эфир, нашатырный спирт, скипидар, являются сильными ядами для спер-миев. Окислы свинца, меди, железа, серебра также очень ядовиты для спер-миев. Поэтому в практике искусственного осеменения пользуются стеклянными, пластмассовыми, хромированными, никелированными инструментами.
Следует также учитывать неблагоприятное действие на спермиев табачного дыма, паров одеколона, духов, чеснока, лука.
Наиболее приемлем для дезинфекции инструментов чистый спирт-ректификат, так как он легко удаляется (быстро испаряется) и хорошо растворяется в воде.
Из антимикробных средств малотоксичны нитрофураны (фурацилин, фуразолидон). Некоторые сульфаниламиды (стрептоцид) и большинство антибиотиков в низких концентрациях безвредны и их используют в составе разбавителей для спермы.
Влияние микробной и грибковой загрязненности. Сперма является хорошей питательной средой для сохранения и размножения многих патогенных и непатогенных микроорганизмов. Количественный и качественный состав микроорганизмов в сперме сильно колеблется в зависимости от здоровья, гигиенического состояния производителя, стерильности искусственной вагины, манежа, лаборатории, срока хранения спермы и многих других факторов. Особенно много микроорганизмов отмечается в воздухе помещения, где содержатся производители. По данным П. Маринова, у быков, выращенных в плохих гигиенических условиях, в 1 мл спермы содержится от 85 до 230 млн. микроорганизмов.
Для осеменения допускают сперму с содержанием в 1 мл не более 5 тыс. микробных тел при отсутствии патогенной микрофлоры и синегнойной палочки.
Источники энергии для движения спермиев. Движения спермиев требуют значительных затрат энергии. Основными ее источниками являются углеводы (глюкоза, фруктоза, сорбит), липиды, свободные аминокислоты. Энергию спермии получают в результате трех сложных биохимических процессов: дыхания, гликолиза и распада аденозинтрифосфата (АТФ).
Дыхание— это получение энергии для движения и других жизненных процессов путем расщепления в присутствии кислорода различных питательных веществ, таких как углеводы, жиры, белки. Наиболее легко при дыхании в спермиях окисляются простые сахара (фруктоза и глюкоза). При наличии фруктозы отмечается меньший расход липидов, а белки почти не расходуются. Около 90% всей энергии спермии получают за счет дыхания.
Гликолиз (или фруктолиз)— это получение энергии путем расщепления сахароз в безкислородной среде. Несмотря на то, что при гликолизе спермии получают в 19 раз меньше энергии, чем при дыхании этот биохимический процесс имеет для спермиев важное значение, так как в половых путях самки кислорода нет.
Энергия, полученная в результате дыхания и гликолиза, аккумулируется в митохондриях спиральных нитей спермия в виде особого органического соединения — аденозинтрифосфата (АТФ). В хвосте спермия имеется специальный сократительный белок — спермозин и движутся спермии за счет энергии, которую отдает спермозину аденозинтрифосфат (АТФ).
Знать каким путем спермии получают энергию очень важно, так как установлено, что основная причина гибели спермиев вне организма — это расходование энергии и накопление продуктов метаболизма или распада.
Методы оценки качества спермы
Понятие об оценке качества спермы включает в себя определение его биологической полноценности, т.е. способности оплодотворить яйцеклетку и дать начало новому жизнеспособному потомству. Методы определения оплодотворяющей способности спермы делятся на прямые и косвенные. К первой группе относится определение по результатам осеменения (отел, ректальное исследование через 2,5-3 месяца после отела, отсутствие полового цикла). Как видно, для оценки спермы этими методами требуется длительное время. Поэтому в практике, наряду с прямыми, применяются косвенные методы. Эти методы позволяют быстро, в течение 10-30 мин определять качество и количество спермиев, полученных в эякуляте и назначить для осеменения такую дозу спермы, которая обеспечивала бы плодотворное осеменение, но не допускала ненужного перерасхода спермы. Ибо одним из необходимых условий получения максимального количества приплода от ценных производителей — это рациональное использование их спермы.
Ценность того или иного косвенного или предварительного метода оценки качества спермы определяется степенью его корреляции с показателем оплодотворяющей способности спермы.
Для прогнозирования оплодотворяющей способности спермы предложены физические, биохимические, биологические методы исследования. В их число входят органолептическая оценка по объему, запаху, цвету, консистенции, однородности, определение рН, осмотического давления, подвижности, выживаемости спермиев, процента их с аномальной морфологией, осмотической резистентностью, устойчивости к холодовому удару, содержание аденозинтрифосфата, активности дегидрогеназ.
В практике искусственного осеменения наибольшее применение получила оценка спермы по органолептическим признакам, концентрации, подвижности и переживаемости.
Для определения качества спермы на чистое предметное стекло стерильной палочкой или пипеткой наносят каплю спермы, накрывают покровным стеклом и микроскопируют при увеличении 140-300 раз. Исследования проводят при температуре 38-40°С, для чего применяют специальные термостаты или обогревательные столики (водяные, электрические).
Сперма может быть густой (средней густоты) — Г, редкой — Р, и без спермиев — А — азоспермия.
Сперма густая — все поле зрения микроскопа густо заполнено спермия-ми. Соответствует приблизительно концентрации более 1 млрд. спермиев.
Сперма средняя — между спермиями имеются промежутки примерно равные длине спермия. Концентрация такой спермы от 600 млн. до 1 млрд. спермиев.
Сперма редкая — в поле зрения микроскопа промежутки между спермиями превышают их длину. В 1 мл такой спермы содержится менее 600 млн. спермиев.
Для более точного определения концентрации спермиев применяют счетные камеры (Томма, Горяева и др.), фотоэлектрические колориметры или электрогемометры в соответствии с имеющимися наставлениями к этим приборам.
Активность (подвижность) спермыопределяют по десятибалльной шкале. Чем она подвижнее, тем лучше качество спермы. Высшую оценку -10 баллов ставят, когда более 95% спермиев имеют прямолинейно-поступательное движение, 9 баллов соответственно — 90%, 8 баллов — 80% и т.д.
Если в поле зрения микроскопа видны спермии с манежным движением (при попадании в сперму воды), то такую сперму обозначают буквой М, с колебательным — К, а неподвижность их — Н. Окончательно оценивают качество спермы с учетом густоты и активности, например: Г — 9 сперма густая, содержит 90% спермиев с прямолинейно-поступательным движением.
Микроскопическое исследование эякулята показывает, что среди нормальных спермиев всегда встречаются патологические формы в виде изолированных головок и хвостиков, гигантских и карликовых спермиев, спермиев с двумя головками, с двумя хвостиками, с головками неправильной формы, с закрученными и ненормально искривленными хвостиками.
Присутствие в сперме большого количества спермиев с ненормальной формой называется тератоспермией. В качестве конкретных причин образования уродливых форм спермиев отмечаются:
1. Поражение семенника и придатка (гигантские и карликовые спермия).
2. Длительные промежутки между коитусами (обуславливающие старение и распад спермиев в придатке), отдельные головки, изолированные хвостики.
3. Половое истощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недостаточного кормления (спермии с протоплазматической каплей в области шейки, тела и хвоста, т.е. незрелые спермии).
Быки, дающие сперму с содержанием более 18% уродливых спермиев, должны рассматриваться как бесплодные.
Определение выживаемости (живучести) спермиев вне организма. Известно, что чем дольше сохраняется жизнь спермиев, тем выше их оплодотворяющая способность. В.К. Милованов (1962) предложил определять абсолютный показатель живучести спермы. Делается это так. Образец спермы, после разбавления эякулята, оставляют в холодильнике при 2-50 С и ежедневно определяют активность спермиев при температуре 38-400С до полной их гибели. Суммировав все произведения времени (в часах), в течение которого наблюдалась та или иная активность, на активность спермиев ( в баллах), получают абсолютный показатель живучести. Для спермы быка он должен быть не ниже 1400. Максимальная продолжительность жизни спермиев (в часах) должна быть для спермиев быка — не менее 200.
Для определения выживаемости спермиев после оттаивания применяют экспресс-метод. Сперму после оттаивания ставят на инкубацию в водяную баню при температуре 38°С. Фиксируют время оттаивания и одновременно определяют исходную подвижность спермиев. Через 5 часов оценку повторяют. Пригодной для осеменения считают сперму быка, исходная подвижность которой не менее 4 баллов и выживаемость 5 ч.
Согласно действующим в настоящее время ГОСТам, свежеполученная сперма быка считается пригодной для разбавления, если она соответствует следующим требованиям:
Объем эякулята не менее 3,0 мл;
Цвет — молочно-белый или кремовый;
Консистенция сливкообразная;
Запах — нормальная сперма быка запаха не имеет;
Концентрация спермиев — не менее 0,4 млрд/мл;
Подвижность — не менее 8,0 баллов;
Выживаемость спермиев при 2-5°С после разбавления ГЦЖ средой:
Относительная — не ниже 249 ч;
Абсолютная — не ниже 1400 ч.
Количество спермиев с аномальной морфологией — не более 18%;
Количество патогенных микробов в 1 мл — не более 5000.
Разбавление, хранение и транспортировка спермы
Чтобы увеличить объем эякулята, а также для того, чтобы сохранить оплодотворяющую способность спермиев на более длительный срок, при хранении их вне организма сперму разбавляют специальными средами.
Для сохранения спермы вне организма нужно создавать условия, которые тормозили бы расходование внутренних запасов в спермиях и не вызывали их гибель.
Синтетическая среда обычно состоит из трех компонентов. В состав среды для спермы быка входят:
Сахара (глюкоза, лактоза) — служат источником энергии для спермиев. Помимо этого они участвуют в поддержании осмотического давления, понижают электропроводность среды, предохраняют спермии от потерь электрического заряда. С желтком куриного яйца образуют биокомплексы, защищающие мембрану спермиев от повреждений при охлаждении.
Цитрат натрия. Создает буферность среды, нейтрализует конечные продукты жизнедеятельности спермиев, связывая ионы кальция и тяжелых металлов, обеспечивает снижение их уровня до оптимального.
Глицерин. Защитное действие глицерина связано с понижением точки замерзания растворов. Глицерин задерживает начало кристаллизации (основной причины гибели клеток при замораживании), замедляет рост кристаллов, снижает осмотическое давление растворенных веществ при замораживании до эвтектической точки (-46,50С). Глицерин всегда находится в жидкой фазе раствора, вследствие чего концентрация осмотически активных веществ уменьшается, что и способствует сохранению клеток.
Желток куриных яиц. Содержит лецитин и липопротеины. Они создают на поверхности спермиев адсорбционный слой, предохраняющий спермии от холодового шока, который подстерегает спермии до температуры — 510С, то есть пока в сперме сохраняется жидкая фаза.
Спермосан ППК. Комплексный антибактериальный препарат, состоящий из пенициллина, полимиксина, канамицина. Такая комбинация эффективно тормозит размножение микроорганизмов в сперме.
Для разбавления и кратковременного хранения спермы быка при температуре +2-50С необходимы следующие компоненты: вода дистиллированная — 100 мл, глюкоза — 3 г, натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятивод-ный — 1,4 г, желток куриного яйца — 12 мл, спермосан ППК — 75000 ИЕ.
С момента получения спермы от производителя до разбавления должно пройти не более 10 мин. В зависимости от подвижности и концентрации спермиев сперму быка разбавляют так, чтобы в одной дозе при всех способах хранения перед осеменением было 10-15 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным движением. Сперму быков, сохраненную при температуре +2-50С, используют для осеменения коров и телок в течение 3 суток с активностью спермиев не ниже 7 баллов, а после хранения в замороженном состоянии — не ниже 4 баллов.
Температура синтетической среды перед разбавлением спермы должна быть одинаковой со спермой (27-35°С). Среду осторожно приливают к сперме, соблюдая правила асептики.
Для разбавления и замораживания спермы быка в форме гранул (капелек) применяют лактозо-желточную среду следующего состава: вода дистиллированная — 100 мл, лактоза — 11,5 г, желток куриного яйца — 20 мл, глицерин — 5 мл.
Разбавляют сперму одномоментно, так чтобы в одной грануле (0,2 мл) после оттаивания содержалось не менее 15 млн. подвижных спермиев. Разбавленную сперму (температура 31±1,8°С) охлаждают при 2-5°С в течение 4 ч и замораживают на фторопластовых пластинках с лунками в специальных емкостях, заполненных жидким азотом. Наносят сперму на охлажденную пластину с помощью охлажденных шприцев или полиэтиленовой капельницы. После выдержки пластины в течение 1-2 мин над жидким азотом и затем в жидком азоте пластину поднимают до верхнего уровня емкости, охлажденной лопаткой сгребают гранулы в охлажденный контейнер или марлевый мешочек и переносят на хранение в специальное хранилище (КВ-620 и др.) емкостью 100-200 тыс. доз.
Более чем сорокалетний опыт применения в нашей стране замораживания спермы в форме гранул наряду с несомненными достоинствами (простота, рациональное использование криогенного оборудования) имеет и недостатки:
1. Большая доля низкопроизводительного труда при осуществлении основных технологических операций.
2. Отсутствие маркировки необлицованных гранул спермы.
3. Прямой контакт с хладагентом (жидким азотом) при хранении гранул спермы в марлевых мешочках, приводит к адсорбции на поверхности гранул микроорганизмов и механических примесей.
Для устранения этих недостатков в нашей стране был разработан метод замораживания спермы в облицованных гранулах. Сущность его заключается в том, что разбавленной спермой заполняют топкую полимерную трубку, затем с помощью автоматического устройства ее делят на спермодозы с одновременной герметизацией и маркировкой.
В 1975 г. Р. Кассу (Франция) для расфасовки спермы при замораживании впервые применил соломинки из полипропилена (пайеты) емкостью 0,5 мл. На бейсогальской станции искусственного осеменения (Литва) в 1981 г. введена была в эксплуатацию технологическая линия по замораживанию спермы быков в полипропиленовых соломинках отечественного производства емкостью 0,25 мл. Расфасовку проводят на специальной машине, которая автоматически наполняет соломинки спермой и укупоривает стеклянными шариками. Соломинки ставят в штативы по 30 штук и заключают в пластмассовые пеналы: их выдерживают 4 часа при температуре 4-50 С, а затем переносят в газообразный азот (температура – 1400С) на 3 мин. для замораживания.
Эта методика наиболее перспективна. Она позволяет достичь высокой степени асептизации, механизации и автоматизации на всех этапах технологической обработки спермы, перевести замораживание спермы на промышленную основу. Криоконсервация спермы в пайетах устраняет недостатки в технологии, присущие изготовлению как необлицованных, так и облицованных гранул, а также исключает потери спермы при оттаивании и осеменении самок.
Сперму, сохраняемую при 2-5°С, фасуют в одноразовые стерильные полиэтиленовые ампулы, полиэтиленовые пробирки объемом по 1 мл или во флаконы из-под антибиотиков. Полиэтиленовые ампулы запаивают, а пробирки и флаконы закрывают стерильной нетоксичной пробкой и закрепляют ее резиновым кольцом. Сперму быка перевозят и хранят в широкогорлых пищевых или пластмассовых термосах.
Замороженную сперму перевозят и хранят в сосудах Дыюара марки СДС-50, СДС-20, СДС-5 и др. Эти сосуды представляют собой стальные или алюминиевые двустенные емкости с вакуумно-порошковой либо многослойно вакуумной изоляцией.
Вместимость их варьирует от 5 до 50 л, суточный расход жидкого азота колеблется от 1 до 3% в зависимости от размеров сосудов и качества изоляции. Периодически сосуды пополняют жидким азотом. Азот доставляют на пункты искусственного осеменения в транспортных резервуарах на автомобилях — азотовозах.
Сохраняемая сперма должна быть полностью покрыта жидким азотом. Только в этом случае гарантируется сохранение оплодотворяющей способности спермы в течение длительного времени. Установлено, что при подъеме канистр более чем на 10 см от уровня жидкого азота, температура сохраняемой спермы поднимается до -50-600С, а процессы рескристаллизации (образование кристаллов при оттаивании), начинаются уже при температуре минус 120-140°С, что ведет к снижению качества спермы. По этой же причине при перекладывании спермы из сосуда в сосуд нельзя держать емкости со спермой вне азота более 5-10 сек.
Оттаивание спермы
Оттаивать замороженную сперму нужно быстро, чтобы не образовались кристаллы, которые, как указывалось, губительно действуют на спермии. Для оттаивания спермы необходима водяная баня и специальный разбавитель. В качестве разбавителей в Приморском крае используется 2,9 % раствор лимоннокислого натрия, расфасованный в стеклянные ампулы объемом 1 мл, а также желточный разбавитель (В.И. Коровко, 1974). Последний представляет собой разбавитель, который применяется для хранения спермы при температуре 2-50 С, но замороженный в форме гранул на фторопластовой пластине объемом 0,4-0,5 мл. Этот разбавитель можно долго хранить, и он лучше защищает сперму после оттаивания от неблагоприятных факторов внешней среды. Желточный разбавитель нужно оттаивать также быстро, как и сперму (при температуре +38-400С), чтобы он не потерял своих защитных свойств.
Оттаивание спермы в цитратном разбавителе проводят так:
1. Тщательно моют и стерилизуют кипячением или фломбированием нужное количество пенициллиновых флаконов и пробок к ним.
2. Ампулу с цитратным разбавителем протирают спиртовым тампоном, открывают ее и содержимое выливают во флакон.
3. В водяной бане создают температуру не ниже 43-45°С и помещают в нее флакон с разбавителем (1 мл).
4. После того, как разбавитель нагреется до температуры 38-40°С, в него помещают гранулу спермы для оттаивания (температура измеряется по термометру, помещенному в водяную баню).
5. Во время оттаивания спермы (15-20 сек) флакон нужно слегка покачивать, не вынимая из водяной бани. Это делается для того, чтобы флакон со спермой постоянно соприкасался с теплыми слоями воды, а также для равномерного размещения спермиев в разбавителе.
Как только гранула полностью растворится, набрать сперму в шприц и немедленно использовать.
Оттаивание спермы в желточном разбавителе.
1. В водяной бане, имеющей температуру 45-50°С, помещают сухой, стерильный, пенициллиновый флакон (больше 500С нельзя, иначе желток свернется).
2. После нагревания флакона до температуры 42-23°С, в него помещают 2-3 гранулы желточного разбавителя (чтобы объем среды был 0,8-1,0 мл).
3. После того, как температура желточного разбавителя достигнет температуры 38-400С, в него помещают гранулу спермы для оттаивания.
4. Как только сперма оттает — немедленно использовать.
После оттаивания держать сперму в водяной бане или на столе, а также в шприце нельзя, это снижает ее качество. Сразу в водяной бане опаивать сперму для двух-трех коров или телок также нельзя, так как нарушается температурный режим оттаивания спермы, что ухудшает ее качество.
Оттаянная сперма подвержена действию холодового удара, ее нельзя снова замораживать, так как она погибнет. Необходимо после оттаивания оберегать сперму от прямых солнечных лучей, яркого электрического света, резкого снижения или повышения температуры, воды, пыли, лекарственных и пахучих веществ, так как все это снижает оплодотворяющую способность спермы.
Техника искусственного осеменения коров и телок
С тех пор как был разработан метод искусственного осеменения, техника введения спермы в половые пути самок непрерывно совершенствовалась. В настоящее время известно 4 способа цервикального (в шейку матки) введения спермы.
1. Визоцервикальный.Эта техника осеменения была предложена в 30-е г. В.К. Миловановым. При этом способе после туалета в области вульвы про-стеррилизованное и увлажненное стерильным физраствором теплое гинекологическое зеркало с осветителем вводят во влагалище, раздвигают бранши, чтобы можно было видеть устье канала шейки матки, затем шприц-катетер направляют в канал шейки матки, продвигают на глубину 4-6 см и плавным нажимом на поршень шприца вводят дозу спермы.
Для дезинфекции шприца в лаборатории пункта должно быть шесть банок с притертыми крышками емкостью 100 мл. В банку под номером 1,3 и 4 наливают стерильный свежеприготовленный 1% раствор натрия хлорида или 2,9 % раствор натрия цитрата, в банку № 2 — 70% спирт.
Если используется сперма одного быка, то проводят обработку только наружной поверхности шприца-катетера спиртовым тампоном (96% спиртом). Необходимо при этом соблюдать осторожность, чтобы капли спирта не попали с тампона в канал катетера.
При осеменении коров и телок спермой разных быков вначале протирают спиртовым тампоном наружную поверхность шприца-катетера, а затем 5-6 раз промывают его раствором из баночки № 1. После этого шприц-катетер обеззараживают 70 % спиртом из баночки № 2. Остатки спирта удаляют промыванием шприца-катетера теплым раствором из баночки № 3 и № 4 по 3-4 раза. После каждого промывания раствор из шприца выливают в толстостенную чашку. Закрыв канюлю шприца стерильной марлевой салфеткой, держа катетером вниз, движением поршня освобождают шприц от остатков раствора.
Можно простерилизовать шприцы-катетеры в сушильном шкафу в разобранном виде при температуре 130-180°С в течение 15-30 мин или прокипятить в дистиллированной воде.
В подготовленный шприц набирают сперму, после чего (катетером вверх) поршнем вытесняют пузырьки воздуха до появления капли спермы, которую берут на предметное стекло для исследования, а шприц помещают на стерильную подставку.
Влагалищное зеркало стерилизуют в кипящей дистиллированной воде и течение 15-20 мин с последующим просушиванием или фломбированием на некоптящем пламени спиртового тампона.
Перед осеменением стерильное влагалищное зеркало увлажняют теплым физиологическим раствором, а осветитель тщательно протирают спиртовым тампоном, смоченным 96% спиртом-ректификатом.
Телок осеменяют, как и коров, но используют при этом зеркало меньшего размера. Этот способ прост, ему легко обучиться, однако подготовка инструментов, их мытье и стерилизация, ежедневное приготовление рабочих растворов требует больших затратах времени. Кроме того, гинекологическое зеркало служит источником термических и механических раздражений рецепторов половых путей, что вызывает ответные реакции самки, снижающие вероятность оплодотворения. Этот метод нельзя применить в тех регионах, где сперму быков замораживают в облицованные гранулы или пайеты.
2. Ректоцервикальный. Это наиболее распространенный из всех используемых в скотоводстве техник осеменения, был предложен в 1938 г. датскими специалистами. В большинстве стран мира он является единственным способом, который в одинаковой мере пригоден как для осеменения коров и телок, так и для пересадки зародышей реципиенту.
Комплект инструментов для ректоцервикального осеменения предназначен для одноразового применения и включает: полистироловую осемени -тельную пипетку длиной 42 см, полиэтиленовую ампулу или 2-граммовый нейлововый шприц с переходной муфтой и полиэтиленовую пятипалую перчатку.
Техник вначале проводит санитарную обработку половых органов животного. Затем пакет с осеменительными пипетками вскрывает, выдвигает одну пипетку и соединяет ее с 2-граммовым шприцем. Осеменительную пипетку наполняет спермой.
Для осеменения этим способом руку в перчатке вводят в задний участок прямой кишки животного. Затем несколько отодвигают руку назад, и располагают ее так, чтобы большой палец разместился в области промежности выше угла половой щели, а остальные четыре пальца надавливали на нижнюю стенку прямой кишки впереди ануса. Это приводит к раскрытию половой щели. Подготовленный инструмент для осеменения вводится в половые пути по верхней стенке преддверия влагалища вначале под углом 30-400, чтобы он не попал в отверстие мочеиспускательного канала, а затем — горизонтально до упора в свод влагалища. После полного введения инструмента во влагалище рукой через прямую кишку фиксируют шейку матки и направляют осеменительную пипетку в цервикальный канал. Убедившись, что пипетка попала в отверстие, легкими вращательными движениями натягивают шейку матки на пипетку до тех пор, пока передний ее конец войдет на глубину 6-10 см. Нажатием на поршень шприца вводят сперму.
Если сперма расфасована в пайеты, то для ректоцервикального осеменения коров применяют катетер Кассу, состоящий из топкой металлической трубки, толкателя и фиксационного кольца. В этом случае техник после оттаивания пайеты отрезает ножницами лабораторную пробку, помещает пай-етy в переднюю часть катетера, надевает на него защитный чехол из пропилена и закрепляет фиксационным кольцом. Осеменение проводят описанным выше способом.
3. Маноцервикальный. Эта техника осеменения коров была предложена учеными Украины в 60-е года. В набор инструментов входят: полиэтиленовая ампула для спермы, полиэтиленовый катетер длиной 7,5 см, перчатка трехпалая из полиэтиленовой пленки. При осеменении коров спермой в облицованных гранулах вместо катетера и ампулы используют зоошприц. Зоо-шприц имеет корпус, съемный флянец и толкатель.
Техника осеменения состоит в следующем: Ампулу извлекают из пакета, колпачок ампулы срезают ножницами или скальпелем, подсоединяют катетер. В осеменительный прибор, состоящий из ампулы и катетера, набирают сперму. После тщательного туалета области вульвы правую руку с надетой полиэтиленовой перчаткой осторожно вводят во влагалище, определяют пальпацией степень раскрытия канала шейки матки, массажируют влагалищную ее часть. Не вынимая полностью руку из влагалища, другой рукой подают осеменительный прибор. Под контролем указательного пальца вводят катетер в канал шейки матки на глубину 1,5-2 см. Продолжая массаж шейки матки кончиками пальцев, подталкивают ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью не войдет в канал (на глубину 6-7 см). Поднимают ампулу на 2-3 см (угол наклона 15-20°) и выдавливают из него сперму путем последовательного сжатия, начиная от донышка. Не разжимая ампулу, руку с осеменительным прибором извлекают из влагалища постепенно, плавными движениями (чтобы избежать возникновения вакуума во влагалище и вытекания спермы). После окончания работы осеменительный прибор и перчатку уничтожают.
При маноцервикальном осеменении коров спермой в облицованных гранулах используют зоошприцы. Гранулу вкладывают в корпус инструмента, досылают ее толкателем до переднего упора и через выходное отверстие делают прокол оболочки гранулы стерильной иглой. После предварительной подготовки половых органов коровы инструмент вводят в канал шейки матки на глубину 6-7 см, после чего большим пальцем нажимают на упор толкателя и выталкивают сперму.
4. Вульвоцервикальная (итальянская) техника осеменения коров применяется в некоторых странах Средиземноморья, Японии, Прибалтики. Сущность этой техники состоит в том, что шейку матки при помощи пулевых щипцов и специального расширителя подтягивают почти до преддверия влагалища, затем сперму вводят пипеткой глубоко в канал шейки матки. Эффективность осеменения этим методом высокая, но требуется два техника осеменатора (В.К. Милованов, 1968).
Факторы, влияющие на результаты искусственного осеменения коров и телок
Знание и опыт техника-осеменатора. Своевременное и успешное осеменение животных во многом зависит от умелой работы техника-осеменатора, его знаний, опыта, отношения к порученному делу. Хорошо понимая это, опытные руководители и специалисты уделяют большое внимание подбору и подготовке техников, созданию для них нормальных условий работы. Практика показывает, что если на должности техника добросовестный, знающий свое дело человек, то хозяйство из года в год получает высокие результаты в работе по воспроизводству стада. Основной секрет успеха передовых техников в том, что они не только сами хорошо знают и строго соблюдают технологические правила искусственного осеменения, но и требуют, чтобы доярки, скотники-пастухи выполняли необходимые условия высокой оплодотворяемости коров (правильно готовили животных к отелу, не допускали грубого обращения с животными при доставке в пункт, обязательно выдерживали животных на привязи после осеменения и т.д.).
К сожалению, имеются еще хозяйства, где подбору и подготовке техников не уделяется должного внимания. Такие хозяйства посылают на курсы людей, не имеющих среднего образования и опыта работы в животноводстве. А ведь для успешного проведения искусственного осеменения необходимо хорошо знать не только технологические правила работы, но и основы зоотехнии и ветеринарии. Известно, что техник обязан вести первичный зоотехнический учет (ставить номера и регистрировать новорожденный молодняк, вести записи о результатах работы, определять время запуска и отела животных и т.д.). Кроме того, метод искусственного осеменения беспрерывно усовершенствуется и усложняется. Все это требует, чтобы техник имел образование не ниже 11 классов.
Работа техника является чрезвычайно ответственной, так как от его работы зависит не только успех фермы, достигнутый на сегодняшний день, но и какая основа заложена на будущее. Известно, чем больше получают телят, тем лучше условия для увеличения производства молока и мяса.
Успех работы по искусственному осеменению зависит от опыта накопленного в процессе работы. В.В. Кияткин провел анализ работы техников в Приморском крае за 1986 г. и установил, что техники-осеменаторы, имеющие стаж работы до 5-ти лет, получали по 84 теленка от 100 коров, при стаже работы от 5 до 10 лет — по 87 телят и при стаже работы свыше 10 лет по 89 телят от каждых 100 коров.
К сожалению, имеется еще немало хозяйств, где наблюдается большая текучесть кадров этой профессии. Объясняется это двумя причинами.
Во-первых, на должность техников подбирают людей, имеющих низкий уровень общеобразовательной подготовки и не имеющих опыта работы в животноводстве.
Во-вторых, не уделяется должного внимания созданию для техника необходимых условий для работы (наличие пункта, обеспеченность необходимыми приборами и инструментами, низкая трудовая дисциплина животноводов, неудовлетворительное лечение гинекологически больных животных и т.д.).
Вместо того, чтобы создавать нормальные условия для работы, повышать квалификацию техников-осеменаторов, устранять недостатки в работе, хозяйства заводят быков-производителей, для так называемой «зачистки» неудовлетворительных результатов работы по воспроизводству стада.
Вред от такой практики очевиден. Наличие быка на ферме снижает у техника чувство ответственности за порученное дело, разрушает основы племенной работы, так как происхождение молодняка вызывает сомнение (кто отец: бык-производитель с племпредприятия или доморощенный с низкой племенной ценностью). Хозяйства несут убытки от затрат на корма, уход и содержание производителей. Общеизвестно, что экономически выгодно держать быка только при использовании для искусственного осеменения. Необходимо отказаться от такой практики.
Кроме техника результаты работы по искусственному осеменению зависят от того, как организована зоотехническая и ветеринарная служба и как организована деятельность всех животноводов. Иными словами, воспроизводство стада — дело рук всего коллектива фермы. Поэтому долг каждого животновода и специалиста добросовестно выполнять свои обязанности.
Кормление и содержание животных. Основным условием, обеспечивающим высокую оплодотворяемость коров и телок, является правильное биологически полноценное кормление. Для хорошей оплодотворяемости молочная корова (живой массой 500 кг, суточным удоем 10-14 кг, при содержании жира в молоке 3,8-4%) должна получать с кормом ежедневно: кормовых единиц 9,6-11,6 кг, обменной энергии 115-137 МДж, переваримого протеина 940-1160 г, сахара 800-1045 г, поваренной соли 65-81 г, кальция 65-81 г, фосфора 45-57 г, каротина 410-520 мг, витамина Д -9,6-11,6 тыс. ME, витамина Е — 385-465 мг. В рационе должно быть следующее количество микроэлементов (в мг): йода -7,2-9,3, кобальта -6,3-8,1 , меди — 82-105, марганца -450-700, цинка — 555-695, железа — 770-930.
Рекомендуется использовать в рационах корнеклубнеплоды, особенно свеклу и куузику. Эти корма не только обуславливают более полное проявление течки и охоты, но и повышают удои, нормализуют пищеварительные процессы и весь обмен веществ у коров. Зерновые корма (шроты, отруби, комбикорма, зерноотходы) в рацион коров следует вводить умеренно, не более 250 г на килограмм молока. Установлено, что введение в рацион зерновых кормов по 400-500 г на килограмм молока при соответствующем уменьшении зеленых и сочных кормов снижают оплодотворяемость коров до 10-20% в одну охоту и вредно для здоровья животных.
Если нет возможности перевести все стадо на правильное, биологически полноценное кормление, его следует ввести для новотельных, подлежащих осеменению коров. При составлении рационов для отелившихся коров нужно помнить, что они через 2-3 месяца должны быть осеменены. При недостатках в рационе витаминов их вводят искусственно путем инъекции. Микроэлементы добавляют в корма. Хорошими стимуляторами воспроизводительной функции крупного рогатого скота является рыба и рыбная мука.
Установлено, что оплодотворение является самым чувствительным индикатором реакции животных на условия окружающей среды. Особые трудности в диагностике алиментарного (пищевого) бесплодия заключаются в том, что половая функция в результате нарушения обмена веществ уже ослаблена, хотя общее развитие и продуктивность животного еще остаются без изменения. Доказано, что при нормальном кормлении в течение 90 дней после отела оплодотворяется 95% коров, а при несбалансированном рационе стельными становится не более 20% животных.
В животноводческих помещениях, где содержатся коровы и телки должна поддерживаться температура воздуха в пределах 8-10°С, относительная влажность 80-85%, освещение — 1:10, 1:15. В составе воздуха должно быть углекислого газа не более 0,25-0,30%, аммиака — 0,01-0,02 мг/л, сероводорода — 0,01 мг/л при скорости движения воздуха 0,2-0,5 м/сек.
Неблагоприятный микроклимат ведет к нарушению воспроизводительной функции животных: ослабляются защитные силы организма и, как следствие, в органах размножения возникают воспалительные процессы.
В специальных опытах установлено благотворное влияние искусственного освещения в зимнее время: оплодотворяемость повысилась до 61%, в то время как в не освещенных помещениях она была ниже 40%.
Необходимые условия для нормальной беременности. Успешное течение беременности и нормальный ее исход зависит от многих условий: генетической совместимости половых клеток (гамет), возраста гамет при оплодотворении (определяется сроками осеменения по отношению к овуляции) условий кормления и содержания.
Установлено, что отрицательное влияние пониженного уровня питания особенно сильно начинает проявляться с 90 дня беременности. Однако уже в ранней стадии беременности следует уделять внимание типу кормления. Так, недостаток некоторых микроэлементов (йода, меди, цинка) вызывает функциональные расстройства нервно-гуморальной регуляции, потому, что медь и цинк входят в состав ферментов, участвующих в синтезе нейрогормонов и гонадотропинов, йод необходим для щитовидной железы, которая находится в тесном взаимодействии с этой системой. Без железа и кобальта не возникает гемоглобин крови, а без углекислого и фосфорнокислого кальция не произойдет окостенение нужных тканей. Поэтому обеспеченности животных этими микроэлементами следует уделять особое внимание.
Из комплекса кормовых факторов особенно большую роль в нарушении беременности играет недостаток в рационе витаминов А, Д, Е. Снижение содержания витамина А (каротина) в сыворотке крови в условиях Приморья начинает отмечаться уже с октября, а в ноябре количество коров со сниженным показателем каротина в сыворотке крови достигает 20%. В зимнее время в крови многих коров витамин содержится в минимальных количествах или обнаруживаются его следы.
Недостаток перечисленных витаминов сказывается на общем состоянии животных, снижает сопротивляемость организма к болезням. Телята от таких коров рождаются слабыми, с повышенной чувствительностью к заболеваниям. Поэтому рекомендуется в зимний период сухостойным коровам и нете-лям за 60, 30 и 10 дней до отела, а также на 8 — 10 и 15 — 20 день после него скармливать с концентратами или вводить внутримышечно один раз в декаду витамины: А по 500 — 700 тыс. ME, Д — 50 тыс. ME и витамин Е — по 3000 — 5000 мг.
В середине и особенно в конце беременности идет быстрое увеличение массы плода. Так, если к концу третьего месяца он весит 100 — 150 г, шестого — 4 — 6 кг, седьмого – 10 — 11 кг, в восемь месяцев 17 кг, то к рождению он достигает 30 — 40 кг, или 7 — 10 % веса матери. Среднесуточный прирост плода в предпоследний месяц беременности составляет 200 — 250 г, а в последний – 500 — 700 г.
Корова должна получать питательные и минеральные вещества, витамины в количестве достаточном как для нормальной работы всех ее органов, так и для обеспечения хорошего развития плода. Кормовой рацион стельной сухостойной коровы по питательности должен быть таким же, как рацион коровы с удоем 10 — 12 л молока.
У нетелей и первотелок питательные вещества расходуются еще на рост материнского организма. Поэтому при недостаточном кормлении животных в период беременности плод развивается плохо, случаются аборты, молодняк рождается слабым, подверженным заболеваниям. У маточного поголовья наблюдаются залеживание перед родами, задержание последа и другие заболевания.
В конце беременности, с целью создания необходимых условий для роста и развития плода прекращают доить коров. Запускают стельных коров за 45-60 дней до родов, а животных с низкой упитанностью и молодых — за 75 дней. Целесообразно выделять глубокостельных животных в отдельные группы и организовывать для них беспривязное содержание.
Главным недостатком содержания коров и телок в зимний период является отсутствие и кратковременность моциона. Коров выпускают на прогулку в базы, или совсем не выпускают из коровника. В базах коровы уже через 20-30 минут начинают неподвижно стоять с выгнутой спиной и взъерошенным волосяным покровом. В результате получается не моцион, а причина для переохлаждения животных. Это приводит к нарушению воспроизводительной функции у коров и телок, снижает жизнеспособность приплода.
Стельным коровам и нетелям активный моцион необходим вплоть до последнего дня стельности, что самым благоприятным образом сказывается на течении родов, послеродовом периоде и способствует своевременному отделению последа.
Не одно лекарственное средство не может так сильно стимулировать послеродовую инволюцию половых органов, как активная прогулка, которую следует начинать на 3-4 день после отела. Применение активного моциона, сопровождающегося движением животных, позволяет на 20% повысить выход телят от 100 коров, на 14% увеличить молочную продуктивность (B.C. Шипилов, 1986). Учитывая это, в передовых хозяйствах нашей страны идут на определенные затраты и оборудуют на зимний период специальные прогоны для скота протяженностью 3-4 км.
Подготовка к родам
Беременность у коров продолжается 270-290 дней и заканчивается родами. Роды — физиологический процесс, во время которого из полости матки выводится зрелый плод (плоды) и выделяются плодные оболочки и воды.
В сложном комплексе факторов, соответствующих наступлению родов участвуют нервная, эндокринная, половая и другие системы организма самки, а также органы плода.
Родовой процесс состоит из трех периодов: подготовительного, выведения плода и последового. У коров подготовительный период родов продолжается от 30 мин до 12 ч (в среднем 6 часов), период выведения плода — от 15 мин до 4 ч, последовый период — не более 6-8 ч.
Для проведения родов в каждом животноводческом хозяйстве должно быть родильное отделение, которое строят по специальным проектам или выделяют для него специальное помещение — светлое, сухое и хорошо вентилируемое, но без сквозняков, с просторными станками и теплым полом. К родильному отделению пристраивают выгульные дворики для моциона животных. У входа в помещение кладут дезоковрик.
В родильном отделении необходимо выделить для персонала комнату, где должна быть теплая вода, умывальник, аптечка и другие предметы, необходимые для оказания акушерской помощи животным.
За 10 дней до предполагаемых родов коров и нетелей переводят в родильное отделение. К признакам или предвестникам приближающихся родов относят:
1. Разрыхление, расслабление и удлинение связочного аппарата таза, западание крестца. Эти признаки обычно наблюдаются за 12-36 ч до начала родов, но нередко за 2-3 недели до них, а иногда лишь непосредственно перед родами.
2. Отечность и увеличение вульвы, выделение из половой щели тягучей, густой слизи (обычно за 1-2 дня до родов) увеличение и отек молочной железы, наполнение сосков, появление молозива. Обычно молозиво выделяется за 1 -3 дня до родов, но иногда лишь во время родов или сразу же после них.
Перед размещением беременных животных в родильном отделении стойла, станки, клетки тщательно очищают и дезинфицируют, пол застилают чистой подстилкой. Коров и нетелей перед вводом в родильное отделение чистят, обрезают и очищают копыта, дезинфицируют конечности и промежность раствором марганцевокислого калия (1:2000).
Наблюдение (круглосуточное) за животными должно быть поручено персоналу, обученному ветеринарно-санитарным правилам и умеющему оказать необходимую помощь при родах.
Для снижения отхода телят при родах, целесообразно проводить роды в боксах — специальных помещениях размером 3 x 3,5 м и высотой 1 м 80 см со сплошными стенами и окном в двери для наблюдения за роженицей и теленком. Коров переводят в чистый бокс за сутки до родов и держат там без привязи. Это дает возможность животному выбрать естественное положение при родах и полностью проявить материнские инстинкты, повышающие жизненный тонус теленка. В боксе роды проходят легче, теленок встает раньше на ноги и у него быстрее проявляется пищевой рефлекс.
У коров и нетелей роды в большинстве случаев происходят ночью. По данным канадских и американских фермеров, роды можно сдвинуть с ночного на дневное время. Такой прием облегчает работу животноводов и позволяет лучше позаботиться о новорожденных телятах. Достигается это тем, что все корма, а также воду животным задают вечером не ранее 22 ч. В результате этого из 146 коров только у четырех телята появились ночью.
Важным резервом сокращения потерь телят при родах является устранение ярко выраженной сезонности родов коров в хозяйствах Приморского края, где в период с ноября по февраль приходится до 60-65% родов. Это самое неблагоприятное по погодным и кормовым условиям время, кроме того, возрастает нагрузка на животноводов, ухаживающих за новорожденными телятами, ощущается недостаток помещений, лекарств и т.д.
У коров в осенне-зимний период, наблюдается длительная депрессия воспроизводительной функции. Они часто не приходят в охоту и оплодотворяются только после выхода на пастбище. Чтобы обеспечить ритмичные роды в течение года необходимо применять меры к тому, чтобы ежемесячно давали приплод 8 – 9 % коров, имеющихся на 1 января.
Итогом нормальной беременности является рождение полноценного жизнеспособного потомства. Клинически полноценными телятами считают таких, которые при рождении имеют вес стандартный для породы (6-8% веса матери) поднимаются после рождения на ноги в течение 0,5-2 ч, обладают четко выраженным рефлексом сосания и хорошим аппетитом. Такие телята после кормления имеют бодрый вид и резвятся, жизнерадостны, шерстный покров ровный, блестящий, первородный кал (меконий) хорошо сформирован. Неполноценные телята вялые, малоподвижные, много лежат и спят, с трудом, неохотно поднимаются, сосательный рефлекс и аппетит слабо выражены.
Здоровье животных.Животные, которые подлежат осеменению, должны быть здоровы. Наблюдениями установлено, что если в период охоты у коров имеются заболевания рогов, копыт, вымени, то осеменение в этих случаях бывает, как правило, безрезультатным (И.И. Виноградов, 1970).
Нарушение полового ритма, т.е. когда корова приходит в охоту через 8-10 дней, указывает на заболевание полового аппарата и осеменять таких коров не следует. Часто после аборта коровы приходят в охоту через 3-4 дня, но осеменять их в этот период также нельзя, т.к. половые пути воспалены.
Объективным показателем состояния половых путей является характер течковых выделений. В случае заболевания половых органов, прежде всего, изменяется консистенция слизи. Она течет, а не тянется шнуром. Изменяется также цвет слизи. Вместо прозрачной она становится молочного цвета, либо желтовато-зеленоватой (гнойной) или красноватой от примеси крови. Коров и телок с влагалищными выделениями надо немедленно показать ветеринарным специалистам.
Следует помнить, что самое опасное — это осеменять животных с гинекологическими заболеваниями, так как в последующем будут наблюдаться многократные повторные осеменения и может возникнуть стойкая патология половой функции.
Качество спермы. Успех искусственного осеменения во многом зависит от качества и количества спермы, вводимой в половые пути самки в момент осеменения. По сообщению А.С. Митюкова и З.С. Эскелева (1987), чтобы плодотворно осеменить корову спермой быка, имеющую 22%-ю оплодотво-ряемость, необходимо израсходовать 9 спермодоз. Если же у быка оплодотворяющая способность спермы 80%, то на плодотворное осеменение потребуется всего 2,5 спермодозы. С повышением качества спермы с 22 до 80% продолжительность межотельного периода у коров снижается с 397 до 332, или на 65 дней меньше. Следовательно, при искусственном осеменении недопустимо снижение требований к качеству спермы.
На станциях искусственного осеменения качество спермы тщательно проверяют. Однако в процессе транспортировки, неправильного хранения или по другим причинам качество спермы может снижаться. В 1972 г. имел место случай, когда на пункты искусственного осеменения совхозов «Партизанский» и «Восток» Приморского края из центральных областей страны были доставлены в тубе (капсула для хранения спермы) гранулы спермы высокого и низкого качества. И только благодаря тому, что на пунктах работали добросовестные люди, это было сразу же обнаружено. Приморская станция, которая осуществляла доставку спермы в хозяйства, немедленно заменила негодную сперму. Поэтому перед каждым осеменением необходимо проводить тщательную проверку качества спермы. Как известно, главным признаком качества спермы является процент спермиев, двигающихся прямолинейно-поступательно.
К сожалению, высокая подвижность спермиев не всегда гарантирует высокую оплодотворяющую способность спермы. В учебном хозяйстве Приморской ГСХА имел место случай, когда на пункт искусственного осеменения была доставлена сперма молодого быка Чубатый (инв. № 3861). Сперма этого быка имела хорошую подвижность после оттаивания (4 балла), но как оказалось низкую оплодотворяющую способность. Из 25 осемененных коров 24 пришли в охоту повторно. Поэтому, наряду с оценкой спермы по подвижности, необходимо определять и ее оплодотворяющую способность. Для предварительной оценки этого показателя определяют процент коров, не пришедших в охоту в течение 26-30 дней после осеменения (оплодотворяе-мость от 1-го осеменения). Процент коров, не пришедших в охоту через 3-4 месяца, может служить окончательным показателем оплодотворяющей способности спермы быка (В.К. Милованов, 1962).
Коров для оценки оплодотворяющей способности спермы следует брать только тех, которые не имели заболеваний родополовых путей и осеменялись после отела в первый раз. В случае низкой оплодотворяющей способности спермы быка (менее 50%) следует об этом ставить в известность племпред-приятие.
В практике имеют место случаи, когда некоторые техники осеменаторы и даже специалисты оценивают качество спермы не по активности спермиев, а по количеству их в поле зрения микроскопа и дают оценку — «сперма редкая». После чего предъявляют претензии племпредприятию, что сперма сильно разбавлена или необоснованно увеличивают дозу спермы для введения корове или телке. В этой связи следует напомнить, что данные, полученные еще в первые годы применения искусственного осеменения, показали, что увеличение дозы спермы свыше 1 мл вызывают не повышение, а снижение оплодотворяемости. Причины этого парадокса двоякие (В.К. Ми-лованов, 1964).
Во-первых, введение спермы вызывают активную реакцию половых путей самки — гиперемию, слущивание эпителия, массовый выход лейкоцитов, усиление мышечных сокращений половых путей и т.д. При больших дозах спермы реакция получается чрезмерно сильной, неблагоприятной как для продвижения и созревания спермиев в половых путях, так и для питания и развития продукта оплодотворения-зиготы.
Во-вторых, доказано, что если к яйцеклетке подходит слишком большое число спермиев, то они своими весьма активными ферментами разрушают и убивают её. При несколько меньших, но тоже чрезмерных дозах оплодотворение происходит, но эмбрион отмирает на ранних стадиях развития, либо отстает в росте от нормальных.
По научным данным, оптимальное число спермиев для глубокого церви-кального осеменения коровы или телки составляет около 10-20 млн. активных спермиев. Это подтверждается как опытом стран с развитым животноводством, так и исследованиями отечественных авторов. Так в США применяют более чем 100-кратное разбавление спермы при 10 млн. активных спермиев в дозе и получают оплодотворяемость от первого осеменения 74-77% (Р.Фут и др., 1982). По данным А.П. Песковатского, уменьшение числа спермиев в дозе с 40-20 млн. до 6-8 млн. с соответствующим 40-50-кратным разбавлением спермы (вместо 10-20-кратного) в условиях глубокого замораживания позволяет на 8-10% повысить оплодотворяемость коров от первого осеменения.
Таким образом, при проведении искусственного осеменения коров и телок необходимо тщательно контролировать количество и качество спермы.
Время осеменения коров
Правильно выбранное время осеменения, одно из важнейших условий высокой оплодотворяемости животных. При этом необходимо решить такие вопросы: когда осеменять коров после родов, во время охоты и по отношению к доению?
Когда нужно осеменять коров после родов? Этот вопрос изучали многие исследователи. В 1960 г. специалисты Башкирской АССР Кудрявцев и Акчу-рин сообщили, что коров можно осеменять через 50-54 ч, а ветврач Н.Г. Акименко (Дагестанская АССР) даже через 10-12 ч после родов (цит. по В.А. Морозову и др., 1966). Комиссионная проверка показала полную несостоятельность таких рекомендаций.
Л.П. Студенцов (1970) продолжал утверждать, что «у нормального организма после нормальных родов быстро проявляется стадия полового цикла, поэтому самок всех сельскохозяйственных животных можно успешно осеменять в первые дни, а крольчих даже в первые часы после родов».
Л.И. Смирнов (1968), Э.Л. Горев (1981), А.И. Сергиенко (1968), B.C. Павлов (1984), B.C. Шипилов и др. (1986), И.И. Полянцев и В.В. Подберез-ный (2001) и другие считают целесообразным осеменять коров в первый месяц после отела. По мнению авторов, только при таком подходе имеется реальная возможность предупредить бесплодие и значительно поднять продуктивность коров. Пропускать же половые циклы, которые наступают до 30-45 дней после отела, значит искусственно создавать яловость.
По мнению В. Мартынова, А. Усольцева (1971) и др., с физиологической точки зрения наилучшие условия для оплодотворения имеются в первый месяц после родов. В этот период коровы только начинают раздаиваться и из их организма не выносится с молоком такого большого количества пластических питательных веществ, как на втором или третьем месяце лактации, когда молокоотдача достигает максимума. B.C. Шипилов (1970) сообщает, что корова с удоем 20 кг в сутки за месяц выделяет с молоком не менее 75 кг жизненно важных веществ (белка, жира, кальция, фосфора, сахара и др.), а месячный плод весит лишь 0,3-0,6 г.
Низкие результаты при осеменении коров в первый месяц после отела сторонники ранних осеменений объясняют серьезными погрешностями в кормлении, содержании и эксплуатации животных.
В то же время ряд отечественных и зарубежных авторов ( И.И. Соколовская, Е.Н. Грекке (1967), А.В. Бесхлебное (1976), Р.Х. Хантер (1984), А.Е. Болгов и др. (2003) приводят данные, показывающие вред ранних осеменений коров после отела. По мнению указанных авторов, низкие результаты при осеменении коров в первый месяц после отела объясняются следующими двумя причинами.
1. Слизистая оболочка матки в течение первого месяца после отела еще не успевает восстановиться (трансформироваться) до нормального состояния. Поэтому покровный эпителий не секретирует эмбриотроф — маточное молочко — основную пищу для зигот, бластоцист и ранних эмбрионов. Матка становится способной обеспечить образование эмбриотрофа только через 40-45 дней после отела. В то же время процессы роста и созревания фолликулов в яичниках, выделение эстрогенных гормонов и зрелых яйцеклеток происходит независимо от завершения трансформации матки. Отсюда возникает противоречие между готовностью коровы проявить охоту и овуляцию после отела (через 14-20 дней) и невозможностью нормального питания эмбриона.
2. Преждевременное введение спермиев в необновленные после родов половые пути может приводить к обострению иммунных реакций в организме коров. Как известно, спермии выполняют роль антигена. После осеменения антигены способны попадать в кровяное русло самки и стимулировать образование специфических антител. В 1928 г. М.П. Тушнов установил, что при соблюдении определенной дозировки и последовательности подкожных инъекций спермы в женском организме удается создать такую концентрацию сперматоксинов, при которой все поступающие во влагалище спермии убиваются. Следовательно, этим способом можно получить своеобразное искусственное бесплодие — прививку против беременности. По данным В.И. Весе-лова (1966), спермоиммунизация возможна при осеменении коров в первые 30 дней после отела, когда слизистая оболочка матки еще не восстановилась и спермии могут проникать в кровяное русло. Чем выше титр спермоантител в организме коровы, тем больше условий для гибели зиготы, понижения оп-лодотворяемости и развития бесплодия (К. Братанов и др., 1984).
По данным Г.У. Солсбери и Н.Л. Ван-Демарка (1966), А. Гордона (1988) оптимальными сроками осеменения коров в США считается 60-85 дн. В Голландии — стране с высокоразвитым животноводством, где годовой удой составляет 4200 кг, жирностью 4,5% коров не осеменяют раньше двух месяцев после отела.
Учитывая противоречивость выводов исследователей о наилучшем времени осеменения коров после отела, нами (В.И. Коровко и др., 1973) изучался этот вопрос в 14 лучших хозяйств Приморского края. Работа проводилась в племзаводе «Комсомолец», ОПХ «Степное», колхозе «Коммунар» и других хозяйствах. Проведенный нами анализ результатов осеменения более 18 тыс. коров показал, что в условиях Приморья хуже всего оплодотворяются животные в первом после родов месяце — всего 25,5% из числа осемененных. Во второй месяц беременности после отела оплодотворяемость повышается до 41,9%, а в третьем — до 48,1%.
Установлена прямая зависимость между числом осеменении на зачатие и временем первого осеменения после отела. Так, в группе коров осемененных, до 30 дн. после отела, требовалось на зачатие в среднем 2,9 осеменения, в группе животных, осемененных в период с 46 до 90 дня, — только 1,8 осеменения.
При ранних осеменениях увеличивается число запоздалых (повторных осеменений — через 30-60 дн). Если у коров, осемененных через 61-90 дней, она составляла 17,1%, то у коров, осемененных до 45 дней — 32,9%. Это говорит о высокой эмбриональной смертности у коров, осемененных в ранние сроки после отела.
Автор данной брошюры привел доводы противоположных сторон, высказал свое мнение и надеется, что читатель сам сделает нужный вывод.
Время осеменения во время охоты. Известно, что у 60-70% коров и телок охота начинается утром и продолжается в течение 12-18 ч. Овуляция происходит через 10-12 ч. после конца охоты. При выборе времени осеменения необходимо учитывать, что в половых путях коров и телок спермии сохраняют оплодотворяющую способность до 24 часов. Яйцеклетка же утрачивает способность к нормальному развитию в первые 6 ч после выхода из полости фолликула. Исходя из этих физиологических закономерностей, лучшим временем для осеменения считается вторая половина охоты. Установлено, что у 80% коров овуляция происходит ночью. Поэтому вечернее осеменение пропускать не следует.
Время осеменения по отношению к доению. Моторика матки является необходимым фактором продвижения спермиев в половых путях коров. Собственная подвижность спермиев в процессе их продвижения в матке и яйцеводах не играет существенной роли, так как они не в состоянии пройти расстояние, равное длине половых органов. Если бы это и случилось, то спермии израсходовали бы свою энергию и погибли к моменту входа в яйцеводы. Окситоцин, который выделяется из задней доли гипофиза во время охоты и во время доения, вызывает ритмические сокращения матки, которые продвигают спермии к яйцеводу. Поэтому коров нужно осеменять до дойки или через 2 ч после доения.
Ветеринарно-санитарные правила при проведении осеменения. Искусственное осеменение — это не просто механическое введение спермы в половые пути самки, а сложная гинекологическая операция, оказывающая влияние на весь организм. Выяснилось, что при искусственном осеменении во много раз увеличивается возможность инфицирования матки по сравнению с естественным, т.к. сперма вводится, минуя канал шейки матки, служащий своеобразным биологическим фильтром. Поэтому поддержание строжайшей чистоты во всей работе техника имеет решающее значение для получения высоких результатов при искусственном осеменении и предупреждения разноса заразных болезней. Спермии необходимо предохранять и от непатогенных микроорганизмов, которые широко распространены в воздухе животноводческих помещений, в кормах, на кожном покрове. Они оседают на влагалищном зеркале, осеменительных инструментах и вносятся на их поверхности во влагалище и шейку матки коровы или телки в момент осеменения. Много микробов попадает в половые пути из воздуха при раскрытии влагалища.
Заселение половых путей микрофлорой из внешней среды и несоблюдение санитарно-гигиенических правил при осеменении является одной из причин эмбриональной смертности. Причем, если гибель происходит на самых ранних стадиях развития (стадия зиготы), то она бывает незамеченной, но влечет за собой повторную охоту, которая наступает почти в нормальные сроки. Если же гибель произошла на стадии бластоцист или эмбриона, то повторная охота у животных проявляется через 30-60 дн. (И.И. Соколовская, 1989).
В связи с этим категорически запрещается осеменять коров и телок в стойлах скотного сарая (особенно визоцервикальным методом). Эту работу надо проводить только в типовых, хорошо оборудованных пунктах. Пункты для осеменения коров и телок необходимо строить по типовым проектам, № 807-6 и 807-7 (Н.Е. Козло, Г.П. Легошин). Пункт должен находится вблизи места содержания скота, потому что когда корову ведут на пункт, она упирается, ее подталкивают, а это отрицательно действует на оплодотворяемость. Его рекомендуется располагать подальше от ветеринарных помещений, так как запахи медикаментов губительны для спермиев. К пункту необходимо иметь хорошие подъездные пути для автомашин, оборудованных транспортным резервуаром (ТРЖК) для своевременной заправки сосудов Дьюара жидким азотом.
Само помещение пункта должно состоять из манежа, моечной и лаборатории. Для поддержания чистоты в помещении пункта столы желательно иметь в виде полок, покрытых легко дезинфицирующим материалом и легко крепится на брусках или кронштейнах к стене. Пол лаборатории покрывают линолеумом или метлахской плиткой. Стены всех помещений пункта облицовывают глазурованной светлой плиткой или, как и потолок, красят белой масляной краской.
В манеже устанавливают станок для фиксации животных, умывальник и стол. Наиболее простой, и удобный станок состоит из дугообразно изогнутой трубы, закрепленной на шарнирах к стене. Дугу опускают на корову так, чтобы она ограничивала ее движение. Удобное положение дуги по высоте регулируют ремнем, лежащим на пояснице коровы.
В лаборатории устраивают оборудованное рабочее место для проверки качества спермы, подготовки инструментов и для ведения документов учета.
Оборудование моечной состоит из стола и приспособления для мытья и стерилизации посуды, инструментов, халатов, полотенец и т.д.
Пункт искусственного осеменения необходимо содержать в абсолютной чистоте. Один раз в неделю полы во всех помещениях пункта, а также стены, станок, столы, табуреты, дезинфицируют 2-3%-ным раствором двууглекислой соды. При входе на пункт должен быть дезоковрик. В зимнее время его располагают внутри помещения для предотвращения замерзания дезраство-ра. Дезоковрик ежедневно заправляют 1-2% раствором едкого натрия. Температура воздуха в помещении пункта должна быть в пределах 16-20° С. Посторонним лицам, не имеющим отношения к работе пункта, вход запрещен.
Для работы в летних условиях целесообразно строить передвижные пункты (на санях) и закрытого типа размером 2,5-3 м. Стены делают из 20 мм досок в пазы, чтобы не было щелей. Изнутри пункт обивают полиэтиленовой пленкой или обоями. В помещении имеется лаборатория и манеж. В лаборатории размещают стол, сосуд Дьюара, шкаф для хранения инструментов, а рядом с дверью в манеж — умывальник. Кроме того, на стене лаборатории укрепляют календарь для техника осеменатора, а также полку для ящика с карточками на коров.
В манеже размещают станок для осеменения животных, который делают из деревянных брусьев (10 х 10 см) или железных труб диаметром 3-4 см. Между станком и перегородкой, отделяющей манеж от лаборатории делают проход шириной 40 см, в который входит доярка или скотник, чтобы помочь технику при осеменении, а затем открыть дверь для выхода коровы или телки из манежа. В манеже имеется две двери. В одну дверь корову заводят, через другую — выводят.
При входе и выходе из манежа делают прочные деревянные трапы, которые на шарнирах крепят к полу манежа. При перемещении пункта трапы убирают внутрь манежа. На передвижных пунктах указанной конструкции очень удобно работать в любое время пастбищного периода независимо от погодных условий. Рядом с пунктом устраивают навес, где выдерживают коров и телок после осеменения. Очень удобны для работы в летних условиях передвижные навесы (на санях). Указанные пункты и навесы применялись в работе хозяйств Черниговского, Пограничного, Хорольского и других районов.
Хранить инструменты нужно в плотно закрытых, застекленных шкафах, окрашенных изнутри и снаружи белой масляной краской. Нельзя хранить инструменты на столе под марлей, так как марля не предохраняет от пыли и микробов, а создает только видимость чистоты.
На летних пунктах искусственного осеменения удобно хранить инструменты в специальных ящиках-термостатах. Размер термостата: длина 80 см, ширина 64 см, высота передней стенки 18 см, задней стенки — 24 см. Внутри его размещают электролампу для обогрева. Такие термостаты очень удобны для работы, особенно ранней весной и поздней осенью.
Техники по искусственному осеменению должны работать в чистых белых халатах, колпаках или косынках, а в неблагополучных по заразным болезням хозяйствах — в фартуках и резиновых сапогах. Спецодежду хранят только на пункте искусственного осеменения. При стирке халаты обязательно кипятят, а после стирки их проглаживают горячим утюгом.
Перед каждым осеменением и после него, техник должен мыть руки с мылом и щеткой, а затем дезинфицировать ватным тампоном, смоченным 70%-ным спиртом, или 3%-ным раствором перекиси водорода. При обработке наружных половых органов нескольких животных нельзя пользоваться одним и тем же ватным тампоном. Все указанное выше необходимо делать для того, чтобы предупредить перенос заразных болезней от одного животного к другому или от животных к человеку.
Техника осеменения коров и телок. При доставке животных на пункт, а также при осеменении необходимо избегать грубого обращения с ними, т.к. при этом ухудшается кровоснабжение половых органов, снижается моторика матки, задерживается овуляция. По данным ученых Одесского сельхозинститута, при грубом обращении с животными оплодотворяемость составила 48%, в то же время коровы и телки, доставленные на пункт без насильственных действий и которых кормили там концентратами, имели оплодотворяемость более 70%. В случае привода на пункт беспокойного животного, его необходимо выдержать перед осеменением 20-30 минут.
При осеменении животное должно быть хорошо зафиксировано в станке, иначе затрудняется правильное введение шприца-катетера или осемени-тельной пипетки в канал шейки матки, травмируются половые пути. Травмы нарушают барьерные функции слизистых оболочек, что приводит к заболеванию эндометритом. Кроме того, при неправильной фиксации животное может нанести травму человеку.
При введении спермы в шприце-катетере или в осеменительной пипетке не должно быть пузырьков воздуха, иначе сперма после введения вытекает во влагалище. По этой же причине сперму необходимо вводить в канал шейки матки на глубину 4-7 см и выталкивать из осеменителного прибора медленно (в течение 5 секунд). При введении спермы во влагалище корова часто остается неоплодотворенной. Объясняется это тем, что лишь 5% спермиев, попавших во влагалище, достигает шейки матки. Разбавление и дозирование спермы проводится на станциях искусственного осеменения и рассчитывается на введение именно в канал шейки матки. Однако в практике нередки случаи, когда сперму невозможно глубоко ввести в канал шейки матки (из-за анатомических особенностей полового аппарата, травмирования при родах). В таких случаях сперму нужно вводить в глубокую часть влагалища, но в количестве 2-3 мл (2-3 дозы замороженной спермы).
Сперму перед введением необходимо подогревать до температуры 38°С. Наблюдениями сотрудников Детскосельской станции искусственного осеменения (Ленинградская область) установлено, что подогревание спермы повышает оплодотворяемость коров на 12%.
После осеменения корову или телку необходимо оставить на некоторое время в станке, иначе при движении или прыжках сперма может вытечь из канала шейки матки. С этой же целью осеменяемых животных рекомендуется выдерживать в стойле до конца охоты. В летнее время на пастбище животных следует держать под навесом, чтобы они не перегревались. Установлено, что повышение температуры тела всего на 1°С приводит к безрезультатному осеменению.
Выстойка также необходима для наблюдения за послетечковыми выделениями и определения эффективности осеменения.
Учет и отчетность на пункте. Получать высокие результаты при искусственном осеменении невозможно без хорошо организованного учета. Необходимо вести учет физиологического состояния животных, особенностей родов, послеродового периода, феноменов полового цикла, а также расхода спермы и ее оплодотворяющей способности.
В Приморском крае широкое применение получила карточная система учета. Сущность ее в том, что на каждое животное заводится специальная карточка, в которую заносятся данные о животном и его воспроизводительной функции, о ветеринарных обследованиях и мерах по лечению больных коров. Карточная система учета позволяет в любое время года получить данные о работе по воспроизводству стада (общее поголовье животных, сколько стельных коров, в каком месяце и сколько будет родов, сколько животных не осеменено, количество больных животных и т.д.).