ТРАНСПЛАНТАЦИЯ ЭМБРИОНОВ
Под трансплантацией эмбрионов (зародышей) понимают процесс извлечения их из матки животных — доноров и перенос в матку животным-реципиентам.
Краткая история и значение метода
Впервые в истории биологии англичанину Вальтеру Хипу в 1891 г. удалось получить беременность после пересадки 2 эмбрионов от крольчихи ангорской породы крольчихе породы бельгийский чемпион.
В нашей стране много работали по пересадке эмбрионов животных в 40-50-х годах: А.И. Лопырин — на овцах, И.И. Соколовская — на кроликах. В 1950 г. нашему соотечественнику профессору Квасницкому А.В. впервые в мировой практике удалась пересадка эмбриона свинье.
История трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота начинается с 1951 г., когда О. Уиллем (США) пересадил хирургическим путем яйцеклетку от одной телки другой и получил живого теленка. В 1964 г. в США родился первый теленок после нехирургической пересадки. Это ознаменовало новый поворот в развитии дальнейшей работы по трансплантации эмбрионов, бескровный метод значительно упростил и удешевил получение трансплантантов и позволил перейти к практическому его использованию в животноводстве наравне с искусственным осеменением.
В нашей стране первого теленка от хирургической пересадки эмбриона получил И.Н. Григорьев в 1977 г., а от нехирургической — Н.И. Сергеев в 1978 г.
Современный этап биотехнологии связан с открытием основных закономерностей в процессах жизнедеятельности организмов на молекулярном уровне. Важную роль в этом сыграли работы Д. Уотсона и Ф. Крика (1955) и М. Ниренберга (1963), которыми было расшифровано строение ДНК и открыт универсальный механизм синтеза белка, заложенный в генетическом коде.
Мы теперь знаем, что все наследственные свойства организмов закодированы в длинных цепочках ДНК — дезоксирибонуклеиновой кислоты. У человека, например, длина обеих цепей ДНК, содержащихся в одном сперматозоиде или ядре яйцеклетки, около 180 см. Эта двойная нить на протяжении своего существования подвергается непрерывным воздействиям, ведь она окружена молекулами, находящимися в состоянии непрерывного теплового движения. Есть в клетке и химически активные молекулы — свободные радикалы и многие другие, также способные нарушать первичную структуру цепей ДНК. Не следует забывать и о квантах вездесущей радиации.
Практическое значение метода трансплантации эмбрионов началось в 70-е годы прошлого столетия. В ряде стран Западной Европы и на Американском континенте. Несмотря на то, что техника эмбриопересадок была небезопасной для здоровья животных и весьма дорогостоящей, фермеры охотно соглашались на их проведение, так как видели огромные потенциальные возможности, заложенные в этом методе. Наибольший размах эта работа получила в США, Канаде, Дании, ФРГ, Великобритании, Франции. Стремительный прогресс в этой области можно проследить на примере США и Канады, где в 1979 г. было получено 15 тыс., в 1986- 50 тыс. телят и в 1990 г. -500 тыс. телят.
Первой европейской страной, занимающейся трансплантацией эмбрионов крупного рогатого скота на торговой основе стала Дания, где эта работа проводится с 1982 г. В том же году был разработан метод глубокого замораживания эмбрионов.
Выживаемость эмбрионов после замораживания и оттаивания составляла 85-90 %, а оплодотворяемость — 50-60 %, то есть такая же, как при трансплантации свежих эмбрионов.
В нашей стране эта работа была развернута в 1984 г. Для ее проведения было создано 30 центров по пересадке эмбрионов. В 1987 г. было сделано около 2000 эмбриопересадок.
Последовавшие затем годы перестройки, сопровождавшиеся разрушительными тенденциями в экономике, привели, в числе прочего, к свертыванию работ по трансплантации эмбрионов, резкому сокращению производственной базы для их проведения.
Трансплантация эмбрионов позволяет значительно увеличить число потомков от лучших коров и создать наиболее однородное, однотипное стадо высокопродуктивных животных в более короткий срок. Так, от одной коровы за жизнь можно получить 10-12 телят, в среднем 3-5. А от одного донора можно получать эмбрионы 4-5 раз в год, поэтому реальная возможность получать по 20-25 телят. В США от одной коровы получили 136 телят за год. Таким образом, используя для получения эмбрионов 20 коров в течение одного года можно создать стадо в 200 коров. Естественным путем можно получить не более 10 телочек и 10 бычков.
Особое значение метод пересадки эмбрионов имеет для получения выдающихся по племенной ценности производителей, так как увеличивается возможность отбора быков от матерей с рекордной молочной продуктивностью. В США и Канаде более 70 % быков-производителей, работающих на станциях искусственного осеменения, получены таким методом.
Полученные в результате заказных спариваний телочки — трансплантанты являются хорошим селекционным материалом для выбора среди них рекордисток нового поколения и использования их в качестве матерей быков.
Пересадка эмбрионов значительно увеличивает эффективность селекционной работы. Так как при естественном или искусственном осеменении теленок наследует лишь часть полезных свойств и признаков быка и приобретает многие наследуемые черты коровы. А при пересадке оплодотворенных яйцеклеток коровам — «инкубаторам» их влияние на потомство сводится практически к нулю.
Метод трансплантации эмбрионов имеет огромную ценность для ускорения создания определенных семейств, линий и типов животных в обычных стадах, распространения в природе мутантных генов (например, устойчивость к какому-либо заболеванию) или, напротив, выявления носителей рецессивных генов и своевременного выбраковывания таких животных из стада.
При выведении новых пород или улучшении существующих практикуется международный обмен животными. В 1974 г. в США было организовано Международное общество по трансплантации эмбрионов (МОТЭ). Обмен эмбрионами удешевляет и упрощает проблему транспортировки животных. В этом случае почти полностью отпадает необходимость сложных карантинных ветеринарных требований, так как эмбрионы практически свободны от бактерий и грибов вследствие многократной процедуры промывания в стерильных средах, обогащенных антибиотиками, трансплантация эмбрионов является высокоэффективным методом акклиматизации импортируемых животных.
Большое значение имеет этот метод для оздоровления стад молочного скота от заболеваний лейкозом, болезни Ауески, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи крупного рогатого скота, так как вирусы этих болезней не передаются через эмбрион.
Трансплантация эмбрионов является единственным возможным способом получения потомства от ценных в племенном отношении коров, утративших способность к размножению в результате болезни, несчастного случая или по возрасту.
Удивительные перспективы, которые открывает метод пересадки эмбрионов в разведении животных, стали реальностью в результате таких выдающихся открытий как методы суперовуляции, стимуляции и синхронизации охоты, нехирургической пересадки эмбрионов и др.
Отбор доноров и реципиентов
Коров-доноров выбирают из племенного стада, хорошо реагирующих на гормональную обработку и дающих биологически полноценные эмбрионы. При отборе коров-доноров учитывают показатели молочной продуктивности, экстерьер и конституцию, желательный тип, линейную и породную принадлежность, что особенно важно для получения от этих животных высокоценных быков. Кроме того, корова-донор должна иметь известное происхождение, подтвержденное по группам крови.
Молочная продуктивность коров-доноров должна составлять 7-12 тыс. кг молока в год, жирностью 3,6-4,3%.
Животные, признанные донорами, должны быть здоровыми, иметь среднюю или заводскую упитанность и ненарушенный обмен веществ, нормально циклировать. Тщательным клинико-гинекологическим исследованием у них исключают патологические процессы в репродуктивных органах (эндометрит, цервицит и др.), а также структурные изменения на почве перенесенных болезней. Идеальный возраст коров для включения в группу доноров — 4-5 лет. По достижении 8-летнего возраста суперовуляторный ответ начинает снижаться.
На суперовуляцию коров-доноров обычно ставят не раньше 60 дней после отела. На протяжении всего срока использования в качестве донора коровам организуют полноценное кормление при умеренной даче силоса и концентрированных кормов, ежедневно предоставляют активный моцион.
В качестве реципиентов можно использовать как коров, так и телок. При составлении плана пересадок эмбрионов следует учитывать вероятность выбраковки 20-25% животных реципиентов из-за непригодности к воспроизводству вообще или из-за отсутствия активного желтого тела в яичниках в конкретно намеченные сроки пересадки. Телки — реципиенты должны иметь хорошо развитые органы воспроизведения с нормальными половыми циклами.
Для наиболее распространенных молочных и молочно-мясных пород телки — реципиенты в 16-18 мес. должны иметь живую массу не ниже 350-380 кг. Коровы-реципиенты должны быть клинически здоровыми и не старше 7 лет. Минимальный срок пересадки — не ранее 60-го дня после отела.
Суперовуляция
Известно, что количество первичных фолликулов в яичниках половозрелой телки колеблется от 100 тыс. до 1 млн. Однако в процессе онтогенеза лишь небольшая часть из них реализуется в виде потомков. Остальные же овоциты подвергаются атрезии (обратному развитию) и в воспроизводстве не участвуют.
Суперовуляцией (множественной овуляцией, полиовуляцией) называют состояние, вызванное гормонами, когда в яичниках животных развивается и овулирует в несколько раз больше яйцеклеток, чем при естественных условиях.
Метод суперовуляции разработал наш соотечественник М.М. Завадов-ский (1934). Он установил, что при введении сыворотки жеребых кобыл /СЖК/ у самок возрастает количество созревших фолликулов. В настоящее время все методы индукции овуляции основаны на использовании гормональных препаратов. В зависимости от вида животных число овулирующих яйцеклеток может быть увеличено в 3-8 и даже в 50 раз. С помощью суперовуляции становится возможным получение большого количества эмбрионов от лучших по продуктивности животных.
Гонадотропин СЖК лучше всего применять в середине полового цикла: с 8-го по 15-16 день. Препараты вводят однократно в дозе от 2 тыс. до 3 тыс. ИЕ. Через 48 ч после введения ГТЖК инъецируют простагландин ПГФ2или одно из его синтетических аналогов. Обычно через 2 дня наступает стадия возбуждения полового цикла с проявлением течки, охоты и овуляции. В этот период осеменяют коров-доноров.
С целью вызывания множественной овуляции применяют препараты фолликулостимулирующего гормона /ФСГ/. Отечественный препарат ФСГ супер по биологической активности и степени очистки не уступает импортным препаратам подобного назначения. Хороший эффект достигается при обработке ФСГ супер с 9-х по 12-е сутки полового цикла. ФСГ супер инъецируют дважды в сутки — утром и вечером с интервалом в 12 ч по 4-8 мг. На третьи сутки после начала обработки инъецируют эстрофан в дозе 500 мкг /2,0 мл/, через 12 ч половинную дозу. Применяя эту схему, получают в среднем 5,3 полноценных эмбриона на донора.
Синхронизация охоты и овуляции у донора и реципиентов
Благодаря глубокому изучению нейрогуморальной регуляции функции воспроизведения сельскохозяйственных животных (В.К. Милованов, Д.В. Смирнов-Угргомов 1940; А.А. Ухтомский, 1950) на основе учения академика И.П. Павлова стало возможным регулировать эти процессы.
В настоящее время хорошо известны связи гинофиз-яичники-матка, хорошо изучен высший регуляторный механизм на уровне гипоталамуса, который является частью центральной нервной системы, где интегрируются сигналы как о концентрации гормонов в крови, так и о нервных импульсах от рецепторов внутренних органов, а также от раздражения сенсорных органов факторами внешней среды.
Установлены и изучены в чистом виде так называемые релизинг-факторы гипоталамуса, благодаря которым происходит регуляция выделения и выработка в гипофизе гормонов: адренокортикотропного /АКТГ/, фоллику-лостимулирующего /ФСГ/, лютеинизирующего /ЛГ/, лютеотропного /ЛТГ/, сомотропного /СТГ/ и др. Релизинг гормоны обладают высокой биологической активностью. В настоящее время все они получены синтетическим путем и могут быть широко применены в практике для регуляции функции размножения.
Из других биологически активных веществ важную роль играют простагландины. Они впервые были обнаружены нью-йоркскими гинекологами Р. Курцюном и Ц.С. Лембом в 1931 г. в семенной жидкости человека. В 1935 г. доктор Морис Голдблат в Англии и физиолог Ван Эйлер в Швеции открыли, что вытяжка из половых желез барана, а также из семенной жидкости человека может стимулировать сокращение мышечной ткани. Профессор Эйлер окрестил это вещество простагландином, ошибочно предположив, что оно вырабатывается предстательной железой — простатой.
Широкое изучение простагландинов началось с 1957 г., когда шведскому профессору Суну Бергстрему удалось выделить в чистой кристаллической форме два из четырнадцати известных на сегодня простагландинов. Говорят, что С. Бергстрему пришлось переработать несколько сот тысяч семенников баранов, чтобы получить всего пару миллиграммов этого вещества. Если бы кто-нибудь из лаборантов, находившихся с ним рядом, чихнул в то время мир, видимо, не знал бы еще долгие годы, что такое простагландины.
Простагландины — это ненасыщенные жирные кислоты с длинной молекулярной цепью, содержащей 20 атомов углерода. Один из предшественников простагландинов — арахидоновая кислота, главный источник которой фосфолипиды — основные компоненты клеточной мембраны. В настоящее время предполагают, что превращение этой кислоты в простагландины играет роль регулятора в функциях клеточной мембраны, а эта мембрана и есть самая главная мастерская по выработке простагландинов.
Особое значение для воспроизводства потомства играют простагландины группы Ф2а, которые образуются в матке и через маточную вену проникают путем диффузии в яичниковую артерию, вызывают лютиолиз желтого тела, тем самым, давая возможность прерывать лютеолитическую фазу полового цикла и вызывать синхронный приход в охоту животных.
Для того чтобы обеспечить синхронную охоту и овуляцию у донора и реципиентов применяют лютеолитические гормоны (эстрофан, супер-фан и др.) путем двойной (с интервалом 2 суток) внутримышечной инъекции реципиентам с таким расчетом, чтобы повторное введение приходилось на 3-й день от начала обработки ФСГ супер коров — доноров.
За обработанным поголовьем ведут наблюдения для своевременного обнаружения течки, общей половой реакции, охоты. Реципиента закрепляют за донором когда полностью совпадают сроки начала охоты.
В США для синхронизации охоты у телок выпускается препарат под названием «Синхро — мейт — В». Он представляет собой совокупность двух гормонов, один из которых имплантируется под кожу, а другой инъецируется внутримышечно. Имплантант помещается под кожу уха телки и сразу же после этого следует инъекция другого гормона. Под действием этих двух гормонов эстральный цикл телки прерывается и временно останавливается. Через девять дней имплантант удаляют из уха животного. Начинается новый эстральный цикл. Так как имплантант удаляется одновременно у всех телок, то цикл начинается в одно и то же время. Через 48-54 ч у всех телок данной группы можно проводить случку или искусственное осеменение.
Кроме новых препаратов стимуляции половой функции животных, имеют значение и старые приемы — применение гестагенов, эстрогенов, гонадо-тропинов и нейротропных препаратов.
С применением гормональных препаратов для стимуляции охоты, отпадает необходимость ежедневного контроля за состоянием половой активности животных, открывается возможность осеменять соответствующие группы животных в короткие сроки, формировать однородные группы, лучше планировать и контролировать производственные процессы.
Осеменение доноров
Для осеменения коров-доноров отбирают быков, положительно оцененных по качеству потомства. Оцененные быки не должны иметь хромосомных аномалий, а их потомство — наследственно обусловленных экстерьерно-конституционных недостатков. Производителей подбирают в соответствии с селекционной программой для конкретного стада животных или в эксперименте по специальной методике.
При проведении искусственного осеменения необходимо иметь в виду, что гормональное стимулирование донора затрудняет продвижение спермиев в половых путях самки. Поэтому полиовуляция у суперовулированных коров наступает примерно через 36 ч. после появления у донора признаков полового возбуждения, тогда как естественная овуляция происходит спустя 30 часов. Донора следует осеменять 2-3 раза с 12-часовым интервалом, используя двойную дозу замороженно-оттаяной спермы, содержащей не менее 40 млн. активных спермиев. Наилучшее время для осеменения — 8-9 и 16-17 ч. Инструмент рекомендуется проводить через шейку матки как при обычном искусственном осеменении.
Лучшим способом считают введение спермы поровну в каждый из рогов матки (В.В. Мадисом, В.Л. Мадисон, 1988).
Допускают осеменение доноров без выявленных признаков охоты через 60-72 ч после инъекции эстрофана (Н.И. Полянцев, В.В. Подберезный, 2001).
Извлечение эмбрионов
В настоящее время в мире почти повсеместно хирургический метод вымывания зародышей из яйцеводов и рогов матки вытеснен нехирургическим. Техника нехирургического извлечения эмбрионов (через цервикальный канал) с использованием 2- или- 3-х канального катетера Фоллея была предложена в середине 70-х годов Р. Елдсеном и Я. Хаслером.
Лучший срок для нехирургического извлечения эмбрионов — 7-8-е сутки (отсчет ведут от первого осеменения); в это время они находятся в передней и средней частях рогов матки, а сфинктер яйцепровода плотно закрыт.
Вымывание эмбрионов проводят в манеже, оборудованном фиксационным станком. Подготовка включает фиксацию животного, обмывание загрязненных мест и чистку кожного покрова, 12-часовую голодную диету и обследование яичников на наличие желтых тел. Извлечение эмбрионов проводят при наличии в обоих яичниках не менее трех хорошо развитых желтых тел.
Для расслабления канала шейки матки и снятия напряжения прямой кишки делают низкую эпидуальную анастезию — вводят 5 мл 2%-ного раствора новокаина. Строптивым животным инъецируют миорелаксант (рампун или рометар).
Вымывание проводят при помощи резинового катетера Фоллея с приспособлением в виде надувного резинового баллона для фиксации его в роге матки. При подготовке к работе катетер Фоллея стерилизуют 96% спиртом-ректификатом, а внутрь вставляют стальной стилет.
Левую руку вводят в прямую кишку и освобождают ее от фекалий. Катетер вместе со стилетом, заключенным в санитарный чехол, направляют в наружное отверстие-шейки матки и расчехляют.
Ладонью левой руки захватывают шейку матки и, поворачивая ее влево-вправо, натягивают на катетер, после чего катетер направляют в один из рогов матки. Как только верхушка катетера достигнет середины рога, дальнейшее его продвижение осуществляют по мере извлечение стилета. Убедившись в том, что конец катетера находится вблизи верхушки рога, а баллон впереди бифуркации, стилет полностью вынимают из катетера.
При помощи 20-граммового шприца баллон заполняют воздухом в объеме 10-15 см , что обеспечивает фиксацию катетера с одновременной изоляцией промывочной полости, ограниченной передним участком рога матки.
Далее к катетеру подсоединяют специальный шприц объемом 50-60 мл, и медленно вводят в рог матки 40-50 мл фосфатного буфера Дюльбекко содержащего 1% инактивированной сыворотки крови новорожденного теленка. Рог матки осторожно поглаживают, чтобы отделить эмбрионы от стенок матки.
Промывную жидкость отсасывают шприцем и собирают в стерильный флакон. Вымывание повторяют 4-6 раз, расходуя 200-400 мл физиологической среды. При вымывании учитывают объем раствора, полученного из матки, так как с его уменьшением число вымытых эмбрионов снижается.
Потери раствора обычно связаны с недостаточной герметизацией промывной полости или нарушением целостности эндометрия (жидкость легко поглощается подслизистым слоем).
После окончания работы по вымыванию эмбрионов в одном роге, катетер переводят в другой рог и манипуляции повторяют. Процедура вымывания эмбрионов обычно длится 20-50 мин. (Н.И. Полянцев, В.В. Подберезкин, 2001).
После завершения вымывания эмбрионов донору вводят через катетер Фоллея в рог матки растворенные антибиотики, например, гентамицин в дозе 500 мг, чтобы предупредить осложнения. Если планируется повторное использование коровы в качестве донора, то на 5-6-е сутки после вымывания зародышей ей инъецируют эсгрофан, что предотвращает развитие стельности и ускоряет возобновление очередного полового цикла.
Степень извлечения эмбрионов этим методом составляет 56-80%.
Поиск и оценка качества эмбрионов
Промывную жидкость отстаивают в термостате при 37°С в течение 30-40 мин. Затем верхний слой объемом 100 мл жидкости отсасывают. Нижний слой объемом 100 мм разливают в 2-3 пластмассовые чашки Петри с расчерченным на полосы или квадраты дном и ведут поиск эмбрионов под стереоскопическим микроскопом МБС-10 при 25-кратном увеличении. Обнаруженные эмбрионы забирают автоматической пипеткой и переносят в чашку Петри диаметром 40 мм или на часовое стекло с небольшим объемом физиологической среды.
Качество эмбрионов определяют по морфологическим показателям, функциональным пробам, в том числе с использованием витальных красителей, а также культивированием.
Биологически полноценными принято считать такие эмбрионы, которые имеют правильную шарообразную форму, гомогенную светлую цитоплазму, не поврежденную прозрачную зону, одинакового размера бластомеры с плотным межклеточным компонентом. Морфологическую оценку эмбрионов проводят на инвертированном микроскопе при увеличении 50-100 раз.
Различают четыре категории качества: отличное, хорошее, удовлетворительное, плохое. Для пересадки используют эмбрионы отличного и хорошего качества. Вопрос о пригодности эмбрионов удовлетворительного качества решают после 12-24-часового культивирования при 37°С. Эмбрионы плохого качества бракуют.
Хранение эмбрионов
После оценки на жизнеспособность эмбрионы дважды промывают в фосфатном буфере Дюльбекко с добавлением антибиотиков, засасывают в мини пайету вместе с небольшим количеством среды. Для пересадки используют в течение 2-4 часов после извлечения из половых путей донора.
Существуют несколько способов хранения эмбрионов: кратковременное вне организма, кратковременное в организме, долговременное в сжиженных газах.
При разработке способа кратковременного хранения эмбрионов вне организма был использован опыт культивирования тканей и клеток. Наиболее подходящей средой для культивирования эмбрионов оказалась ТСМ 199 с добавлением 20%-ной эмбриональной сыворотки или сыворотки крови оленей. Эмбрионы хранят в атмосфере обогащенной углекислым газом, при постоянной температуре 37°С. В таких условиях они остаются жизнеспособными в течение 24-48 ч.
Для кратковременного хранения, интерес представляет помещение эмбрионов в половые пути крольчих, с последующей их трансплантацией.
После пребывания в этих условиях в течение 3-4 дней сохранили жизнеспособность 75% эмбрионов коров и 16% эмбрионов свиней.
В 1947 году советским ученым И.И. Соколовской, И.В. Смирнову и В.К. Милованову впервые в мире удалось получить потомство у животных, при осеменении спермой подвергнутой замораживанию до -20-40°С. Родились нормальные жизнеспособные крольчата. Через три года этими же учеными были получены 66 крольчат, 11 телят и 5 ягнят от спермы, хранившейся в жидком азоте (- 196°С). В то же время аналогичные опыты проводились в Англии. Эти работы явились поворотной вехой в животноводстве. Они открыли совершенно новые возможности сохранять генофонды ценных животных-производителей, транспортировать сперму на какие угодно большие расстояния. Интенсивное животноводство сегодня немыслимо без консервации генетического материала.
Дальнейшие исследования показали, что в жидком азоте можно сохранить не только живые клетки растений и животных, но также зародыши на ранних стадиях их развития. В 1972 г. удалось разработать метод замораживания эмбрионов млекопитающих (мышей). Глубокое замораживание эмбрионов крупного рогатого скота впервые осуществили Уилраден, Полдж и Раусон в 1978 г. Предложенная ими техника в последствии была усовершенствована Лейбо (1984). В нашей стране работы по криоконсервации эмбрионов были начаты в 1979 г. 12 марта 1980 г. в лаборатории трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота Всесоюзного института животноводства был получен теленок от пересадки замороженного эмбриона. После замораживания и трехсуточного хранения в жидком азоте эмбрион был оттаян и пересажен телке-реципиенту, от которой и родился бычок, по кличке Замороженный с массой тела 45 кг.
При внедрении в практику криоконсервации эмбрионов отпадает необходимость синхронизации охоты или содержания большого количества реципиентов для однодневной пересадки, появляется возможность отделить процесс получения эмбрионов от собственно трансплантации. В таких странах, как Франция, США и Канада, до половины получаемых зародышей в настоящее время подвергается криоконсервации.
Данный метод позволяет создавать банки эмбрионов и яйцеклеток особо ценных и редко встречающихся, а также находящихся под угрозой исчезновения животных. По данным К.И. Сергеева и др. (1991) в мире насчитывается более 1000 пород крупного рогатого скота. Хранение в замороженном состоянии позволит значительно снизить затраты на сохранение этого генофонда и распространение по всему земному шару пород животных с оцененным генетическим кодом.
В настоящее время применяется два способа глубокого замораживания эмбрионов: в программированном режиме (ступенчатое охлаждение) и одномоментный (витрификация).
При замораживании по первому способу отобранные эмбрионы последовательно проходят через растворы криопротектора (глицерин или диме-тилсульфоксид) возрастающих концентраций, приготовленные на фосфатно-буферном солевом растворе Дюльбекко с добавлением 20%-ной фетальной сыворотки теленка. После этого эмбрионы переносят в пробирки или ампулы (по 1-4 в каждую) вместе с 0,3-0,4 мл среды с криопротектором.
Емкости с эмбрионами герметизируют (пробирки закрывают фольгой, ампулы запаивают) и помещают в камеру замораживателя, где охлаждают до -7°С в режиме 1°С/мин. После достижения указанной температуры вызывают кристаллизацию среды. Для этого в жидком азоте пинцетом касаются стенки пробирки (ампулы) в зоне «верхнего края столбика среды.
Дальнейшее охлаждение (до -28° или -35°С) ведут со скоростью 0,5°С/мин, затем скорость уменьшают до 0,1°С/мин; через 10 мин доводят до конечной температуры погружением в жидкий азот /-196°С/.
Одномоментное замораживание (витрификацию) впервые описал А. Массип в 1987 г. Установлено, что эмбрион, который на 20% состоит из твердых составных частей и на 80% из воды, подвержен двум негативным влияниям — образованию интрацеллюлярных кристаллов и воздействию высоких концентраций солей, что ведет к его гибели .Чтобы предотвратить гибель эмбрионов применяют высокую концентрацию криопротектора и быструю скорость охлаждения.
Замораживают быстрым методом в мини пайетах емкостью 0,25 мл. В пайету последовательно засасывают 0,5 М раствор сахарозы, воздух, 1,0 М раствор глицерина с эмбрионом, воздух, 0,5 М раствор сахарозы / для приготовления 0,5 М раствора сахарозы в 1 л ФСБ — фосфатно-солевом буфере растворяют 171 г сухого вещества сахарозы; для приготовления 1,0 М раствора глицерина к 4 мл глицерина добавляют 36 мл ФСБ. Концы пайеты закрывают с обеих сторон пластиковыми пробками. После эквилибрации (26-30 мин) пайету, содержащую эмбрион, выдерживают 5 мин в парах жидкого азота, затем опускают в сосуд с жидким азотом.
Оттаивают пайеты в водяной бане при 37°С до исчезновения льда. Содержимое переносят в лабораторные чашки и выдерживают в них 10 мин. При этом происходит одноступенчатое разбавление криопротектора раствором сахарозы. Жизнеспособные зародыши промывают 1-3 раза в растворе ФСБ с 20% -ной фетальной сывороткой теленка.
После окончания промывки эмбрионы оценивают на жизнеспособность и засасывают в стерильную пайету в такой последовательности: среда, пузырек воздуха, среда с эмбрионом, пузырек воздуха, среда, пластиковая пробка.
Заправленную пайету вкладывают в наконечник катетера Кассу. Готовый к работе прибор передают технику по пересадке эмбрионов или кладут на непродолжительное время в термостат с постоянной температурой 37° С.
Пересадка эмбрионов
До середины 70-х г. прошлого века применяли исключительно хирургический метод пересадки эмбрионов. Доступ к матке обеспечивался лапоратомией по белой линии живота или в области подвздоха под общим наркозом. Рог матки, прилегающий к яичникам с функционирующим желтым телом, подтягивали к разрезу, делали прокол стенки матки концом капиллярной трубки в нескольких сантиметрах от места соединения с яйцепроводом. При этом стремились избежать повреждения сосудов и кровотечения. Эмбрион с небольшим количеством физиологической среды вводили в верхушку рога матки.
После хирургической трансплантации приживаемость эмбрионов была довольно высокая. Так, в Корнельском Университете (США) группа Л. Хас-лера за период с 1980 г. по 1986 г. осуществила хирургическим путем 7652 эмбриопересадки, приживляемость составила в среднем 71,3%.
В Японии был разработан трансвагинальный метод пересадки эмбрионов у крупного рогатого скота: трансплантационную пипетку вводили в матку через прокол верхнего свода влагалища.
М.И. Прокофьев, В.Я.Черных (1986) предложили способ и прибор для пересадки эмбрионов через прокол тканей стенки таза. Прокол рога и введение эмбриона контролируется рукой, находящейся в прямой кишке.
Описанные хирургические методы требуют высокого профессионального мастерства и опыта.
Нехирургический метод пересадки состоит в переносе эмбриона в рог матки по принципу искусственного осеменения — трансцервикальным путем. При этом эмбрион, помещают в пайету, которую заряжают в катетер Кассу (диаметр 3 или 4 мм) или сходный с ним по конструкции западногерманский катетер (минитуб). Иногда поверх катетера надевают защитный полиэтиленовые чехол, который прорывают при входе инструмента в шейку матки.
Перед эмбриопересадкой реципиента фиксируют в станке, хвост бинтуют и подвязывают к шее, вульву и промежность моют теплой водой с мылом, дезинфицируют септонексом. Животному делают низкую сакральную эпидуральную анестезию. Для блокирования рецепторов матки и предотвращения реакции отторжения эмбриона сильно возбудимым животным вводят внутримышечно 10 мл ханегифа или другой маточный релаксант.
Пересадку эмбрионов производят следующим образом. Подготовленный катетер Кассу вводят во влагалище, затем под контролем руки, находящейся в прямой кишке, продвигают через цервикальный канал до середины рога на стороне яичника с желтым телом. Убедившись в правильности расположения прибора, медленно выталкивают содержимое пайеты в просвет рога матки.
Реципиентам после пересадки эмбрионов обеспечивают полноценное кормление ежедневно предоставляют активный моцион. Через 2-3 месяца после пересадки проводят ректальное исследование на стельность.
Безрезультатная пересадка не нарушает плодовитости коров или телок. Если эмбрион не приживляется, то реципиента искусственно осеменяют и в короткий срок он становится стельным. Американские специалисты наблюдали за 910 телками после пересадки эмбрионов. Стельными оказались 55% из них, 26% не стельных телок после пересадки вновь пришли в охоту и были осеменены в первые 24 дня после пересадки, 12 % в последующие 24 дня и 6% — в срок свыше 48 дней.
НОВЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В БИОТЕХНИКЕ РАЗМНОЖЕНИЯ ЖИВОТНЫХ
Трансплантация эмбрионов создает благоприятные условия для исследований в области биотехники размножения животных: получение яйцеклеток после гибели животных, оплодотворение яйцеклеток вне организма, целенаправленное получение двоен, регулирование пола, получение трансгенных животных, создание химер, клонирование животных.
Культивирование овариальных ооцитов вне организма
Известно, что после разрыва фолликула в яйцепровод поступает не зрелое яйцо, а ооцит II порядка. Заключительная фаза овогенеза имеет место уже в процессе движения ооцита по яйцеводу и в процессе оплодотворения. В значительной мере этот процесс инициирует проникающий в цитоплазму клетки спермий. Заключительная фаза овогенеза состоит в том, что ооцит II порядка претерпевает второе мейотическое деление, с образованием временного яйца и полярного тела.
Незрелые ооциты выделяют из яичников коров, преждевременно выбывших из эксплуатации, но очень ценных в племенном отношении. Яичники доставляют в лабораторию в термосе с физраствором (температура 30-35°С) не позже 1,5 ч после убоя коровы или телки. Ооциты извлекают из полостных фолликулов, имеющих диаметр 2-5 мм, путем вымывания средой Дюльбекко с добавлением гепарина и антибиотиков). Вылавливают пастеровской пипеткой под микроскопом МСБ — 9 и проводят морфологическую оценку визуальным путем.
Извлеченные из фолликулов ооциты инкубируют в висячей капле, под слоем вазелинового масла при температуре 38,5°С, срок инкубации — 24 ч. Используют культуральную среду ТС-199 с добавлением 10% -ной феталь-ной сыворотки теленка и гентамицина. Для ускоренного созревания ооцита в среду добавляют гормоны: фоллитропин + лютропин и эстрадиол.
Культивирование овариальных ооцитов вне организма в перспективе может стать важным дополнительным источников эмбрионов.
Оплодотворение вне организма
Удивительное явление природы — соединение мужской и женской половых клеток и образование новой клетки -зиготы ( в переводе с греческого -«упряжка из двух быков»), способной расти и развиваться происходит в организме матери. Английским ученым Патрику Стептоу и Роберту Эвардсу после тринадцати лет работы удалось из яйца и спермы произвести плод в колбе и пересадить его в готовом виде в матку. В 1978 г. родилась Луиза Браун — первый на земле ребенок, зачатый вне организма («ребенок из пробирки»).
С 1987 г. коммерческая компания «Биотехнология животных» (Великобритания) практикует пересадку эмбрионов от мясных телок коровам – рецепиентам в молочных стадах. Источником эмбрионов служат яйцеклетки, извлеченные на бойне и оплодотворенные в лаборатории.
Для оплодотворения вне организма яйцеклетки необходимо провести капацитацию (созревание) спермиев. Капацитацию спермиев проводят методом «swin up». С использованием среды p-TALP.
Оплодотворение ооцита капацитированными спермиями происходит в среде Fert-TALP при экспозиции 16-18 ч.
Зиготу отмывают от прилипших спермиев и переносят для дальнейшего культивирования в среду СДМ с культурой эпителиальных клеток яйцепро-вода. Срок культивирования — 144-168 ч.
Эмбрионы оценивают по морфологическим признакам, заправляют в пайеты и пересаживают коровам или телкам-реципиентам. Приживляемость составляет 20-26%. (Полянцев Н.И., Подберезный В.В., 2001).
Целенаправленное получение двоен
Метод разделения эмбрионов на ранних стадиях развития (с помощью микрохирургии) впервые был разработан и успешно апробирован на овцах датчанином С. Вилладсеном в 1979 г. Суть его заключается в следующем. Эмбрион на стадии развития в 60 клеток с помощью микроманипулятора делится на две половинки, которые помещают для дальнейшего развития в половые органы животного-реципиента. В результате осуществления этой операции получают двух генетически идентичных животных. Этот метод позволяет повысить число двоен до 70%, вместо 3-4% в обычных условиях.
Методика расщепления эмбрионов может быть использована для проверки молодого быка, ценность генетического потенциала которого обычно выявляется через 6-8 лет. В случае использования этого метода, одна половинка этого эмбриона сразу же вводится коровам-реципиентам, а вторая -направляется на хранение в замороженном состоянии и будет использована только после того, как станет известна потенциальная ценность генотипа данного быка.
У телок реципиентов с двойнями, как правило, не наблюдается отклонений в течение стельности и в период отела. Средняя продолжительность двойневой стельности несколько меньше, чем одинцовой (258±3,4, против 278,1±3,2) дней. Двойни при рождении имеют в среднем меньшую живую массу 26,0±О,5О кг), чем одинцы (38,2±0,94кг), хотя общая живая масса двух телят всегда больше (50,8±2,58 кг).
Регулирование пола
Первые успешные опыты по регулированию пола у насекомых провел Б.Л. Астауров. Шелководам давно известно, что мужские коконы дают шелка процентов на 30 больше, чем женские. Применение на практике открытия Астаурова, усовершенствованного В. А. Струннико-вым, позволило увеличить выход шелка на 39%.
В практике разведения животных также очень важно научиться управлять образованием в потомстве мужских и женских особей. Так, если исходить, из того, что бычок при потреблении одного и того же количества корма дает на 10% больше мяса, чем телка, то снижение количества телок с 50%, рождающихся в настоящее время, до примерно 20%, необходимых для поддержания поголовья стада мясного скота, позволило бы значительно увеличить выход говядины на единицу затраченного корма. Напротив, для животноводов, занимающихся разведением молочного скота, важно рождение телочек, а не бычков.
Трансплантация двух однополых эмбрионов позволяет избежать бесплодия (фримартинизма) телок, рождающихся в разнополых двойнях.
Уже много лет усилия ученых направлены на разделение спермиев, несущих X и У — половые хромосомы, чтобы влиять на соотношение полов в потомстве (центрифугирование, цитофлуорометрия, иммуногенетические способы, определение рН и др.) Однако все попытки разделения спермиев не оправдали надежд исследователей.
В связи с внедрением в практику метода трансплантации эмбрионов появилась реальная возможность решения проблемы регуляции пола на основе анализа их кариотипа и удаления эмбрионов нежелательного пола. Этим методом удается правильно определить пол в 70% случаев.
В перспективе для целенаправленного получения особей желательного пола может быть применен метод микрохирургической замены X и У хромосом. Манипуляции с отдельными хромосомами уже проводились на растениях и земноводных.
Получение трансгенных животных
Метод трансплантации эмбрионов открыл широкие возможности для манипуляции с генетическим материалом. Животные, содержащие чужеродные гены, получили название трансгенных. В 1982 г. Ричарду Палмитеру, Ральфу Брикстеру и их сотрудникам /США/ удалось первыми осуществить успешный перенос гена от одного вида животных другому.
Биологи вводили чужие гены прямо в оплодотворенную мышиную яйцеклетку при помощи капиллярной трубочки всего 1/24 000 дюйма в диаметре. Операцию проводили непосредственно после оплодотворения яйцеклетки на той стадии, которая называется стадией пронуклиуса, когда происходит слияние ядер яйцеклетки и спермия. Сегодня применяются и другие способы переноса генов, например электроток или вирусы.
Результатом переноса стала мышь, несущая ген гормона роста крысы, Эта трансгенная мышь — позже получившая название «сверхмышь «- прославилась после того, как ее фотография появилась на обложке английского журнала «Нейчур» рядом с обычной мышью, вполовину меньшего размера.
Но главный результат опыта заключался в том, что трансгенная мышь росла в два раза быстрее, чем обычная. Есть уже и первые успехи в получении трансгенных коров, овец, свиней, хотя эти работы пока очень дороги.
Создание химер
В древнегреческой мифологии химера — это чудовище с головой и шеей льва, туловищем козы, хвостом дракона, порождение стоглавого огнедышащего чудовища Пифона и полуженщины — полузмеи Ехидны. К химерам можно отнести также кентавров — лесных или горных демонов, полулюдей, полулошадей, пристрастных к вину спутников Диониса, а также сфинксов — фантастических существ с телом льва и головой человека, воплощенных в древнеегипетских статуях.
В средние века существовали также фантастические и наивные представления о потомстве, полученном от самых разных животных: жираф от верблюда и леопарда. Страус — от верблюда и воробья. Вполне вероятным считалось существование жюмаров (бык х кобыла, осел х корова, бык х ослица).
Из древнегреческой мифологии слово «химера» перешло в биологию, где оно стало обозначать организм или его часть, состоящий из генетически разнородных тканей, принадлежащих разным индивидуумам. Впервые этот термин употребил в 1907 г. немецкий ботаник Г. Винклер для форм растений, полученных в результате сращения генетически различных клеток в один зародыш (первичный химеризм), либо путем трансплантации тканей, переливания крови и т.д. (вторичный химеризм).
В 1984 г. в Кембридже (Англия) С. В. Фэбилу удалось получить потомство, построенное из «мозаики» клеток, часть которых несла гены одного из родителей, а часть — другого. Химерное животное (коза-овца или «ковца») унаследовало от козы рога, а от овцы — лохматую шкуру.
В 1997 г. в экспериментальном хозяйстве Дубровицы родился бык Ералаш, родителями которого стали, пять животных. Были использованы две коровы-донора айширской и черно-пестрой породы, два быка — красной гол-штино-фризской и голландской черно-пестрой породы. Новорожденный был создан на основе конструирования генотипа на ранних эмбрионах. Вымытые из двух стельных коров эмбрионы были разделены на половинки, после чего пересажены в эмбрион, из которого удалили все содержимое. Таким образом, новый генотип несет наследственность четырех пород крупного рогатого скота. На заключительном этапе объединенный эмбрион был пересажен корове- реципиенту (пятое животное), которая и родила Ералаша. Он имел бе-ло-красно-чёрную окраску. Этот бык за два с половиной года набрал вес более 700 килограммов.
Клонирование животных
Клон-это биологическая популяция, состоящая из генетически идентичных организмов. Для растений клонирование как метод размножения давно и хорошо известен: с ним имеет дело каждый садовод, отрезающий черенок от куста и укореняющий его в землю.
В результате усилий селекционеров-животноводов создаются выдающиеся животные, такие как корова Россиянка из племзавода «Россия» Челябинской области, которая родилась 19.02.1980 г. Она за 305 дней лактации дала 16086 кг молока, жирностью — 4,18%. Высший суточный удой — 82,5 кг. Добиться успехов животноводам трудно, так как им приходиться иметь дело с отрицательными последствиями полового размножения, которые проявляются в том, что потомки выдающихся животных обычно бывают менее выдающимися, хотя, как правило, и лучше среднего. Эта регрессия к среднему является результатом перетасовки генов при образовании зиготы из двух родительских клеток. Вот почему возможность клонального размножения представляет большую ценность, так как даст возможность получать несколько поколений идентичных животных и этим ускорять селекционный процесс.
В 1996 г. эдинбургским ученым (Великобритания) под руководством доктора Яна Уилмута удалось методом клонирования (почкования) получить овечку Долли. История появления на свет самой знаменитой овцы мира такова.
1. Клетку из вымени взрослой овцы 6 дней в лабораторных условиях выращивали в культуру.
2.У другой овцы взяли неоплодотворенное яйцо, из которого удалили ядро.
3. Клетку овцы-донора слили с пустым ядром в лабораторных условиях с помощью электрического разряда.
4. Эмбрион имплантировали в матку третьей овцы, выступающую как суррогатная мать.
5. Эта третья овца рожает ягненка Долли, идентичного первой овце, у которой была взята клетка.
На овцах ученые не остановились. Не прошло и месяца после открытия, которое потрясло мир, как американские исследователи клонировали обезьян — наших с вами ближайших сородичей из мира природы. Эксперименты с ними проводились в Орегонском региональном центре по изучению приматов, в результате на свет появились две обезьяны, генетически абсолютно идентичные тем зародышам, чьи клетки были использованы при их создании.
Исследователи считают, что клонирование открывает для человечества невиданные горизонты.
БЕСПЛОДИЕ ЖИВОТНЫХ И МЕРЫ ЕГО ПРОФИЛАКТИКИ
В нашей стране нет единого мнения о том, когда же корову считать бесплодной. Так, многие отечественные акушеры (B.C. Шипилов, Г.В. Зверева, В.А. Павлов и др.) поддерживаются положения А.П. Студендова, согласно которому самка любого вида животных может и должна быть оплодотворена в первый месяц после родов, а отсутствие беременности по истечении указанного срока рассматривается как бесплодие.
В то же время А.В. Бесхлебное, В.К. Милованов, И.И. Соколовская и др. считают, что биологически и экономически оправданным является осеменение коров не раньше 2-3 месяцев после отела.
В мировой практике скотоводства бесплодной считают корову, не осемененную или осемененную, но не оплодотворившуюся, по истечении 2-х месяцев после отела. Телок относят к категории бесплодных при отсутствии оплодотворения по истечении одного месяца после достижения физиологической зрелости и перевода в группу животных, подлежащих осеменению.
Бесплодие — биологический показатель и является признаком или следствием какого-либо состояния (в том числе болезни), в результате которого нарушается воспроизводство потомства.
В молочном скотоводстве бесплодие наносит большой экономический ущерб из-за снижения молочной продуктивности, недополучения приплода, утраты частью бесплодных животных племенной и хозяйственной ценности. Каждый день бесплодия приводит к потере 3 кг молока и 0,003 теленка. Стоимость новорожденного теленка приравнивается к цене 3,61 ц молока базисной жирности. Она соответствует стоимости основной продукции (молоко), которую можно получить за счет кормов, расходуемых на рост и развитие теленка во внутриутробный период.
Различают следующие формы бесплодия сельскохозяйственных животных (по Н.И. Полянцеву):
1. Алиментарная недостаточность: недостаточный или избыточный уро-вень кормления, дефицит питательных веществ, одностороннее кормление, скудное кормление ремонтного молодняка (алиментарный инфантилизм).
2. Неудовлетворительные условия содержания и погрешности в эксплуатации: климатический стресс, эмоциональный стресс, эксплуатационный стресс.
3. Анатомические дефекты репродуктивных органов: инфантилизм врожденный, фримартинизм, аплазия (отсутствие) или дипликация (удвоение) отдельных частей половой системы.
4.Нарушение технологии искусственного осеменения: стресс-реакции самки при подготовке и проведении осеменения, неправильный выбор времени осеменения, нарушение правил подготовки спермы к использованию, доставки к месту осеменения и введения в половые пути самки, отсутствие гинекологического контроля за осеменяемым поголовьем.
5.Старческий возраст: изменения в половой системе, обусловленные старением организма.
6. Гинекологические болезни: патогенное воздействие продуктов воспаления на спермии, яйцо, зародыш; дисбаланс гормонов, контролирующих половой цикл.
7. Иммунные факторы, которые возникают в результате следующих биологических процессов. Спермии и спермальная плазма являются носителями специфических антигенов белковой природы. Антигены при введении в половые пути самки способны преодолевать иммунный барьер матки и проникать в кровь. Иммунная реакция организма на чужеродные белки спермы проявляется образованием спермоантител, которые накапливаются в секретах влагалища, матки и яйцепроводов.
Спермоантитела проявляют свое действие как агглютинины (склеивают спермии), лизины (растворяют спермии) и могут вызвать местные аллергические реакции на введенную сперму (спазматические сокращения матки, усиленный фагоцитоз и др.). При многократных осеменениях самки происходит её иммунизация.
Воспалительные процессы в половых органах (вагиниты, цервициты, эндометриты, сальпингиты) усиливают иммунные реакции. Их возникновению способствуют также травмы слизистых оболочек влагалища и шейки матки при родах и осеменении.
Незавершенная инволюция матки, А-гипоавитаминозы также влияют на иммуннобарьерные функции слизистых оболочек, что способствует нарастанию спермоантител.
Иммунные реакции препятствуют процессам оплодотворения (иммобилизация или гибель спермиев), либо нарушают развитие зиготы и зародыша (эмбриональная смертность), либо вызывают аборт.
Признаками бесплодия самок являются длительное отсутствие половой охоты, многократные неплодотворные осеменения и т.д. Если не принимать мер по профилактике и лечению бесплодия, то оно ведет к яловости.
Яловость — это количество (в процентах) коров и телок, не давших приплода в течение календарного года в пересчете на 100 маток. Например, на начало года имелось 100 коров, от них получено 80 телят, значит, яловость равна 20%.
Яловость — это хозяйственный (экономический) показатель, и он зависит не только от организации естественного или искусственного осеменения, но также от сохранности маток в период беременности, количества абортов, мертворожденных. Иными словами, результаты работы по воспроизводству стада отражают постановку зоотехнической и ветеринарной работы и зависят от деятельности всех животноводов фермы. Ликвидировать яловость значит ежегодно получать от 100 коров, имеющихся на начало года, по 100 и более телят.
Важный показатель эффективности воспроизводства — это индекс осеменения, т.е. число осеменений, затраченных на всех коров или телок, деленное на количество оплодотворившихся. Индекс осеменения считается удовлетворительным, если оплодотворение произошло не позже второй половой охоты.
В скотоводстве для оценки работы по воспроизводству стада рассчитывают продолжительность сервис-периода (время от отела до плодотворного осеменения). В хозяйствах, где от каждой коровы получают по теленку, этот показатель в среднем за год не превышает 80 дней.
Нарушение половой функции самцов определяют термином «импотенция», что означает неспособность их к воспроизводству потомства. Она проявляется в двух формах: в нарушении половых рефлексов, с полной или частичной потерей способности к половому акту и в неспособности к оплодотворению вследствие патологических изменений спермы. Причины импотенции такие же, как бесплодия у самок. Она возникает вследствие недоразвития животных, нарушении условий кормления и содержания, патологии половых органов, неправильного использования, а также вызывается искусственно, например, кастрацией. Кроме того, у самцов встречаются нарушения безусловных половых рефлексов в виде онанизма и гомосексуализма.
Онанизм — выделение спермы вне коитуса. Одной из главных причин онанирования — нерегулярное и редкое использование самцов, отсутствие активного моциона.
Гомосексуализм — половое извращение, состоящее в противоестественном половом влечении к особям своего же пола. Данный порок проявляется у самцов при задержке полового использования, скученном содержании, отсутствии моциона.
Для предупреждения бесплодия и яловости необходимо:
1.Привлекать к работе с животными людей старательных, добросовестных. Постоянно заботиться о повышении их профессионального мастерства.
2.Выращивать хорошо развитое здоровое потомство.
3.Организовывать полноценное кормление и хорошее содержание.
4.Проводить своевременное осеменение самок и регулярно использовать самцов.
5.Строго соблюдать правила естественного или искусственного осеменения.
6.Использовать только высокоценных племенных производителей.
7.Создавать нормальные условия для проведения родов и послеродового периода.
8.Систематически проводить работы по профилактике и лечению гинекологических и других заболеваний животных.
9.Строго соблюдать зооветеринарные правила эксплуатации животных.
10. Вести тщательный учет результатов работы по воспроизводству стада.
КАК СБЕРЕЧЬ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ
Наиболее сложный период сохранения молодняка — это первые 10-15 дней жизни. В этот период происходит процесс адаптации молодого организма к факторам внешней среды. В некоторых хозяйствах на этот период приходится до 40-50% потерь телят.
Для предупреждения гибели телят приводится 22 совета, рекомендованных практиками и учеными.
1. Своевременно запускать стельных коров. Средняя продолжительность сухостойного периода для крепких нормально упитанных коров 60 суток, для ослабленных 70-75 суток. Для запуска высокопродуктивных коров из их рациона исключают сочные корма и концентраты, ограничивают водопой. В Первый день запуска коров доят два раза, во 2,3 и 4-й дни — по одному разу, затем один раз в 2 дня и доение прекращают. При этом каждое доение должно быть полным (тщательным). Запуск считают законченным, если молочная железа значительно уменьшилась («подсохла»).
2. Полноценно кормить и правильно содержать беременных животных. О здоровье и сохранности новорожденных телят надо заботиться, начиная с периода их утробной жизни, но особенно в сухостойный период. Увеличение массы плода коровы с 7-го по 9-й месяц составляет 75%. Примерный рацион дня сухостойной коровы состоит из 5-6 кг сена, 10-15 кг силоса, 5-6 кг кормовой свеклы, 2 кг концентратов, 60-70 г поваренной соли. Нужны также витаминные и минеральные смеси (рекомендуемая доза витамина А — 50-60 тыс. ИЕ, витамина Д — 10-15 тыс. ИЕ). Важно также давать смеси, содержащие кальций, фосфор и йод. Для сохранности телят большое значение имеет хорошо организованный моцион для коров. Бесспорно доказано, что отсутствие моциона сухостойных коров приводит к затяжным родам и послеродовым осложнениям.
3. Коров следует держать в чистоте. При этом уменьшается возможность соприкосновения теленка с навозом и грязью, поэтому значительно возрастают шансы на его выживание.
4. Необходимо иметь соответствующие условия для отела. Стойло должно быть чистым, сухим, с хорошей подстилкой, достаточно проветриваемым и без сквозняков. Не допустимо чрезмерное переохлаждение новорожденного сразу же после его появления на свет. Это приводит к нарушению всасывания иммунных глобулинов (белков). Период их всасывания сокращается до 8-10 ч, тогда как в норме они усваиваются в течение 24-34 ч.
5. Важно присутствовать при отеле коровы. При отеле должен присутствовать человек, способный оказать квалифицированную помощь. Именно квалифицированную, неумелые действия по насильственному извлечению теленка могут нанести ему вред.
Роды — естественный физиологический процесс и, если нет патологии, животное не нуждается в акушерской помощи. Продолжительность нормальных родов (период выведения плода) — от 15 мин до 4 ч.
Новорожденного теленка принимают на чистую мешковину или простыню из грубой ткани. Сразу после рождения теленка чистым полотенцем или марлевой салфеткой удаляют из его ноздрей, рта и ушей слизь, протирают ему губы и носовое зеркальце. Если плод вышел, а пузырь не разорвался, его надо немедленно разорвать.
После родов следует проследить за выделением последа, который корова может съесть, что плохо отразится на её здоровье и качестве молока . В норме послед должен отделиться в течение 5-6 ч. Если не отделился, то лучшее средство — выпаивание роженице околоплодных вод (5-6 л). Действие этих вод проявляется от 4 до 8 ч после их применения. Хорошо действует сахар / по 250 г / два раза в день.
6. Необходимо продезинфицировать пуповину. Пупок следует смазать 5%-ной настойкой йода, а пуповину завязать на расстоянии около 2,5 см от её основания и затем обрезать на 1,3 см ниже перевязанного места, оставленный необработанный остаток пуповины открывает доступ бактериям и другим болезнетворным агентам.
7. Перед первым кормлением теленка провести санитарную обработку вымени коровы. Перед доением или первым подпуском теленка, вымя коровы обмывают теплой водой и обтирают полотенцем (салфеткой). Руки моют теплой водой с мылом и дезинфицируют. Первые струйки молока сдаивают в отдельную посуду и уничтожают. Только после этого приступают к выдаиванию молозива или подпускают теленка к вымени, помогая ему взять сосок.
8. Теленок должен получить молозиво в кратчайший срок после рождения. Не позднее чем через час после рождения теленок должен высосать из материнского вымени молозиво, которое является исключительным по своим свойствам биологическим продуктом, богатым защитными белками иммуноглобулинами, способными обезвредить токсические выделения микроорганизмов. Полезно знать, что с каждым часом после отела защитные свойства молозива снижаются. Опыт показал, что около 70% телят, получивших молозиво впервые с запозданием (через 5-6 ч) подвергаются заболеваниям, как правило, тяжелой формы. В результате этого немало телят погибает, не смотря на лечение, а сохраненные плохо растут и развиваются. Установлено, что молочная продуктивность переболевшей новорожденной телочки снижается во взрослом состоянии на 18%, а мясная продуктивность бычков на 20%.
9. Новорожденного теленка не надо спешить отделять от матери. Надо дать корове облизать теленка. Этот своеобразный массаж укрепляет мышцы теленка и ускоряет его обсыхание, в то же время ускоряет процесс отделения последа у коровы и восстановление её родополовых путей, измененных беременностью и родами.
Процессы обратного развития матки и всех половых органов коровы сопровождаются выделениями характерной жидкости, именуемой лохиями. К 15-му дню их выделение полностью прекращается. Если выделение лохий продолжается после 15 -го дня после родов, то это свидетельствует о патологическом течении послеродового периода.
10. Молозиво и молоко для выпойки телят должно быть высокого качества. Отличное молозиво содержит 66-80% защитных белков, плотность его в этом случае составляет 1,061 -1,080. Поскольку наибольшее количество иммуноглобулинов содержится в молозиве в первые полчаса — час после отела, то целесообразно невысосанное теленком молозиво выдоить, сохранить ( в холодильнике) и использовать для следующего поения ( предварительно подогрев до 37°С в водяной бане).
Плохое молозиво содержит 40-45% белков-иммуноглобулинов, плотность его менее чем 1,040.
В послеродовом периоде у коров могут наблюдаться различные отклонения в половой функции (субинволюция матки, эндометрит, залеживание после родов, послеродовой парез и др.). В этом случае молочная продуктивность и качество молока снижается. При даче такого молока новорожденным телятам у них в 10 раз и более регистрируются желудочно-кишечные болезни. Поэтому необходимо применять действенные меры для лечения гинекологических болезней коров.
11. Необходимо рационально использовать молозиво. Молозиво имеет в два раза больше питательных веществ и энергии. В нем в 100 раз больше витамина А, в 6 раз — белка и в 3 раза минеральных веществ по сравнению с обычным молоком.
В странах с развитым животноводством фермеры вместо цельного молока и его заменителей используют сквашенное молозиво, что способствует сокращению стоимости кормления и снижению заболеваемости телят.
Чтобы получить заквашенное молозиво, порции его от первых 6-8 доений рекомендуют собирать в пластиковые емкости и хранить при комнатной температуре (не выше 24 и не ниже 7°С) с тщательным перемешиванием, по крайней мере, два раза в день. Молозиво от больных маститом коров или содержащее антибиотики сохранять не рекомендуется.
Начиная со второго кормления молозивом теленку можно дать смесь свежего материнского молозива со сквашенным от предыдущего доения. На второй день теленок должен получить за кормление 1 кг сквашенного молозива, разбавленного 0,5 л теплой воды. На третий день для крупных телят можно 1 кг сквашенного молозива разбавить уже 1 л теплой воды. Кормят телят такой смесью 2 раза в день до окончания выпойки. Таким образом, каждый теленок за молочный период сможет потребить 65-75 кг сквашенного молозива, сберегаемого в течение 5-6 недель.
12. Инъецировать телятам витамины А, Д и Е. В первые дни после рождения телята могут получать с молозивом и молоком достаточное количество витаминов. Однако для страховки , особенно в последние зимние месяцы, рекомендуется инъекция в течение первого дня жизни 1 млн. ИЕ витамина А, 150 тыс. ИЕ витамина Д и 100 тыс. ИЕ витамина Е.
13. Нельзя перекармливать телят. Суточная доза молозива составляет 1/5 -1/6 массы новорожденного. При содержании телят с матерями обязательно надо поддаивать коров не менее трех раз в сутки. В первые 5-6 дней выращивания телятам дают молоко коровы-матери, а в случае ее заболевания -молоко одновременно отелившейся здоровой коровы. Нецелесообразно применять высокий (более 10% от массы теленка) уровень молозивного кормления.
Умеренное молозивное, а затем и молочное кормление телят вынуждает их раньше, активнее и в больших количествах потреблять концентраты, сено, сенаж и другие корма. Кроме того, такое кормление способствует профилактике желудочно-кишечных заболеваний.
Во многих странах с высокоразвитым молочным скотоводством практикуется исключение из рациона телят молочных кормов, как только теленок начинает потреблять примерно 0,5-0,7 кг комбикорма-стартера. Если в хозяйстве нет необходимого для телят набора высококачественных кормов, то как минимальную норму следует принимать 300-350 л молока или 200 л молока и 300 – 400 л обрата.
14.Телятам следует выпаивать материнское молозиво в течение 5-7 дней. Выживаемость телят зависит от количества молозива, выпиваемого в
первое кормление. Если скармливали 0,25 кг молозива, то гибло 3,3% телят, если 1 кг то 0,7% или почти в 5 раз меньше. Общее потребление молозива в первые 12 ч жизни должно быть не менее 2,5-3,5 кг (или из расчета 5% от живой массы теленка).
15.Следует применять выпаивания молозива с помощью сосковых поилок. При этом молозиво попадает в желудок тонкой струйкой, что препятствует образованию плотных, трудно перевариваемых сгустков. Молозиво следует давать новорожденному в первые дни жизни 4-5 раз из сосковой
поилки, а затем поить молоко из ведра. За одно кормление выпаивают по 1,5-
2 л (в зависимости от физиологического состояния теленка). К 7-10 дневному возрасту, если теленок здоров, норму молочных кормов можно довести до 6 л.
16. Необходимо содержать в чистоте оборудование для кормления. Для каждого теленка желательно иметь отдельную соску, предварительно подвергнутую санитарной обработке. Так, резиновые соски ополаскивают водой и кипятят в 1%-ном растворе пищевой соды 1-2 мин. Необходимо также содержать в чистоте весь станок для теленка, который должен быть свободным от навоза и грязи.
17. Телят следует держать отдельно друг от друга. Раздельный способ содержания имеет ряд преимуществ: рацион теленка можно контролировать, уменьшается возможность диареи (поноса), снижается возможность передачи болезней. Исключается сосание друг друга, облегчено наблюдение за каждым теленком.
18. Теленку необходимо обеспечить хорошие условия содержания. Важно, чтобы в помещении было достаточно свежего воздуха, но не было сквозняков. Температура воздуха должна быть 16-200С, относительная влажность-70%.
Заслуживает внимания холодный способ выращивания телят, который впервые в 1932 г. применил выдающийся зоотехник С.И. Штейман. Многочисленными научными работами было подтверждено, что низкая температура воздуха при хороших условиях кормления благотворно, закаливающе действует на здоровье, развитие сердечно-сосудистой и пищеварительной системы телят, повышает резистентность организма, угнетает развитие болезнетворной микрофлоры, снижает заболеваемость желудочно — кишечного тракта и органов дыхания. Кроме того, существенно удешевляется выращивание телят за счет снижения затрат на сооружение капитальных телятников, отпадает необходимость в отопительных устройствах, топливе, дополнительных штатах на обслуживание теплогенераторов.
Сущность данного способа выращивания в следующем : через сутки после рождения теленка его помещают в фанерный домик длиной 200 и ширимой 140 см. Высота передней стенки 120 см, задней -110 см .Чтобы фанера не размокала, домик обивают полиэтиленовой пленкой или рубероидом. Домик покрывают односкатной крышей и рядом с ним делают выгульный дворик площадью 200 X 140 см. В домике нет пола, он заменяется глубокой подстилкой: снизу опилки или стружки слоем 20-25 см, затем солома -40-45 см. Внутри размещается кормушка для сена, концентратов и минеральной подкормки. Одна из стенок домика закрывается мешковиной или брезентом, при низкой температуре (ниже -10-15 °С) или в непогоду. Ежедневно в домик добавляют свежую солому для создания теплого логова. Здесь телята находятся 45-60 дней, а затем переводятся в групповые клетки.
Лучше всего домики размещать в крытой галереи шириной 510 см и высотой 260 см. Это позволяет создать хорошие условия труда для обслуживающего персонала.
Для телят, выращиваемых «холодным методом», норма выпойки цельного и обезжиренного молока повышается соответственно до 300 и 600 -700 л.
19. За телятами раннего возраста следует внимательно наблюдать. Клинически полноценными телятами считают таких, которые при рождении имеют массу стандартную для породы (6-8% массы матери), поднимаются на ноги в течение 0,5-2 ч, обладают четко выраженным рефлексом сосания и хорошим аппетитом. Такие телята после кормления имеют бодрый вид и резвятся, жизнерадостны, шерстный покров ровный, блестящий, первородный кал (меконий) хорошо сформирован.
При появлении первых признаков подавленности, вялости, потери аппетита, насморка, затруднительного дыхания, диареи, теленка следует сразу перевести в теплый станок отдельно от других и начать лечение. В свое время М.И. Калинин говорил, что «ни в одной отрасли труда, исключая только уход за человеком, не требуется такого внимания и любви к делу, как в животноводстве». Это вдвойне справедливо по отношению к уходу за новорожденными животными.
20. Своевременно приучать теленка к сухим кормам. Начиная с третьего — пятого дня жизни через 1 — 2 ч после выпойки молозива или молока телятам дают кипяченую воду, подогретую до 20 — 25°С, а с двухнедельного возраста телята должны иметь постоянный доступ к кормушке с высококачественным сеном или травяной резкой. С третьей декады теленку необходимо давать по 100 — 200 г сеянной овсяной муки или специального комбикорма, по 10 г соли и мела ежедневно. Отмечают, что чем скорее телята получают сухой корм, тем меньше возможность диареи.
21. Своевременно лечить расстройство пищеварения, при расстройстве пищеварения к молоку надо добавлять кипяченую воду. При этом молоко в желудке теленка свертывается в рыхлые творожистые сгустки и лучше переваривается. Если понос не прекращается, надо пропустить 1 — 2 поения молоком, а вместо него давать 1,5 — 2 л кипяченой воды. Можно поить теленка отваром ромашки или льняного семени (1 — 20 частей воды). Если не помогает -обратиться к ветеринарному специалисту.
22. Не следует вносить никаких изменений в режим кормления и содержания, если развитие теленка протекает благополучно. В течение первого месяца теленок прибавляет в массе ежедневно на 350 — 450 г, а затем – 450 — 700 г.
Итак, полноценное кормление коров и молодняка, а также высокая санитарно-гигиеническая культура их содержания — вот фундамент высокого выхода и сохранности телят.
НАРОДНЫЕ МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ ДИАРЕИ ТЕЛЯТ
Диспепсия (диарея) новорожденного молодняка наносит большой экономический ущерб животноводческим хозяйствам. Падеж телят от того заболевания составляет 10-20 %. Диспепсия возникает преимущественно на фоне нарушения кормления, технологии содержания коров-матерей и выращивания молодняка (Авакаянц Б. и др., 1992; и А.Е. Болгов и др., 2003).
В настоящее время животноводство России переживает трудные времена.Повсеместно не хватает ветеринарных препаратов из-за финансовых трудностей.В то же время имеется богатый арсенал народных средств лечения телят. Опыт этот мы и попытались обобщить.
1. Луковый настой.Его применяют при различных функциональных расстройствах желудочно-кишечного тракта, особенно в начале заболевания. Как известно, в луке содержатся фитонциды, убивающие или задерживающие развитие микробов колипарафитозной группы. Важно знать, как приготовить настой, чтобы из него не улетучились эти крайне летучие вещества.
С этой целью берут 2 л физиологического раствора (8,6 г поваренной соли на 1 л свежекипяченой воды) и вливают его в бутыль емкостью 2,5-3 л, сквозь пробку которой пропущен сифон с резиновыми трубками и зажимом. 200 г доброкачественного репчатого лука (обязательно с медом — красной чешуей) быстро растирают в мелкую кашицу на терке или мясорубке и добавляют к физиологическому раствору. Смесь встряхивают 2-3 минуты. Чтобы действующие вещества не испарялись, в бутыль осторожно по стенке наливают 50-100 мл растительного масла, полностью покрывая им всю поверхность жидкости (Н.М. Носов, 1991).
Настой заготавливают впрок, но не более чем надвое суток. Его насасывают при помощи сифона перед самым выпаиванием и дают больным телятам по 3-5 мл на 1 кг живой массы, 5 раз подряд через каждый час. Все это время молодняк не кормят, а затем выпаивают молозиво или молоко. В дальнейшем настой дают за полчаса до очередного кормления.
2. Отвар луковой чешуи.Для лечения поноса у телят можно использовать 5 % — ный отвар луковой чешуи. Её собирают с хорошо высушенных медно-красных луковиц. Теленку выпаивают из сосковой поилки по 150-300 мл отвара через каждый час 4-6 раз подряд.
3. Настой чеснока .100 г на 2 л воды. Готовят и используют также как и настой лука.
4. Отвар из льняного семени.Для его приготовления берут 50 г очищенного от сора льняного семени и промывают его теплой водой. Затем высыпают в эмалированную посуду, заливают 1 л чистой воды и кипятят не менее часа, часто помешивая, чтобы семя не пригорело. По мере выкипания воду доливают так, чтобы отвара получился 1 л. Полученный отвар фильтруют через марлю. В закрытой посуде его можно хранить в темном прохладном месте в течение трех дней. Перед выпаиванием отвар подогревают до 37-400С и добавляют 1 % соли. Дают его больным телятам или с профилактической целью взамен части молозива или молока по 0,5 л в день.
5. Сенной настой.Готовят его из хорошего бобово-злакового сена, скошенного в начале цветения растений. Сено измельчают, укладывают в емкости (молочные фляги, бочки), заливают горячей водой (температура 80-900С) из расчета 5-6 л воды на 1 кг сена. Емкость плотно закрывают и выдерживают в темном помещении в течение 4-6 ч. После этого настой процеживают, остуживают до температуры парного молока и выпаивают телятам. Готовят сенной настой в расчете на разовое использование. На сенном настое могут быть приготовлены болтушки из просеянной овсяной муки.
6. Уголь печеного хлеба.Для приготовления пшеничный хлеб режут на мелкие кусочки, ставят на сковородке, на печь и держат там, пока они не обуглятся. Затем угли толкут в мелкий порошок. Перед употреблением в 1 л чистой воды разводят 100 г этого порошка. Склонным к поносам телятам дают с профилактической целью примерно по 1-1,5 стакана жидкости после поения их молозивом или молоком. Кусочки печеного хлеба можно положить и в кормушки (Е.М. Бородулин, 1977).
7. Питательная смесь на основе чая.Заваривают обычный чай и, остудив его до температуры парного молока, растворяют в нем белки свежих куриных яиц и подсаливают. На 1 л чая расходуют белки трех яиц и 10 г соли. Доза такой смеси — 5-10 г на 1 кг массы теленка (Е.М. Бородулин, 1977).
8. Запаренная сахарная свекла.Используют в качестве диетического корма телятам дистрофикам, больным и выздоравливающим. Для приготовления свеклу моют и очищают от кожицы, режут на мелкие кусочки и парят в горшках 6-8 часов. Горшки закрывают плотными крышками, воды не добавляют. Приготовленную свеклу растирают и скармливают телятам в первые дни жизни по 5-10 г на 1 кг живой массы, добавляя ее в молоко при каждом кормлении. С мясного возраста норму можно увеличить до 20 г на 1 кг живой массы.
9. Сок столовой свеклы. Применяют для лечения телят, больных кровавым поносом. В начале заболевания 3-4 клизмы (по 250-300 мл сока), повторенные через 2 часа, обрывают даже тяжелые формы болезни. Для повышения эффективности действия сока в начале лечения телятам ставят глубокую очистительную клизму из теплого (400С) физиологического раствора. В зависимости от возраста теленка расходуют от 0,5 до 4 л раствора. Когда видимые признаки болезни исчезнут, клизму из свекловичного сока повторяют ещё 2 раза (Н.М. Носов, 1991).
10. Сок, измельченная масса и отвар моркови. Свежие, сочные корнеплоды моют, очищают от земли щетками, режут на мелкие кусочки и измельчают на мясорубке. Через чистое полотно или три слоя марли отжимают сок. Свежеприготовленный сок и морковную массу добавляют в молоко 2-3 раза в день по 5-6 г на 1 кг веса. С увеличением возраста телят эту норму увеличивают до 8-10 г.
Для приготовления отвара морковную массу (150 г на 1 л воды) кипятят в эмалированной посуде не более 15 минут. Отвар выпаивают (38-400 С) сразу после приготовления взамен молока 1-20 раза в день по 500-600 мл.
11. Овсяной отвар.Для приготовления его чистый доброкачественный полнозерный овес заливают 10-кратным количеством воды и отваривают. После закипания воды держат на слабом огне в течение 6-8 ч, доливая время от времени кипяток. Затем отвар процеживают через полотно или марлю и слегка подсаливают. Используют взамен молока 4-5 раз в день по 500-600 мл 1-2 дня.
12. Сбор Михаила Теплицкого. При поносах автор рекомендует такой сбор: листья дуба, веточки ивы, ягоды черемухи, листья и шишки ольхи, трава тысячелистника, плоды шиповника в соотношении 2:2:1:3:2:1. Два стакана сухой смеси заваривают ведром крутого кипятка. После остывания выпаивают такой чай в течение дня.
13. Отвар корней и листьев элеутерококка.Отвар готовят следующим образом: высушенные корни измельчают, заливают холодной водой 1:10, плотно закрывают, нагревают до кипения и кипятят 30 минут. После остывания отвар процеживают через марлю или густое металлическое сито. Отвар из корней или листьев элеутерококка-колючего рекомендуется скармливать слаборожденным телятам за 30 мин до обеденного кормления по пол-литра теплого (35-400С) лекарства вместе с 600 тыс. ед. синтомицина. Выпаивать рекомендуется из сосковых поилок в течение 16дней.
14. Овсяной кисель.Просеянную овсяную муку слегка поджаривают и заливают горячей водой из расчета 2,5 л на 1 кг муки. Через 1-2 ч добавляют 10-15 г поваренной соли и кипятят до загустения. Перед выпойкой овсяный кисель разбавляют молоком. Давать его телятам можно со второй декады жизни. Впрок кисель не готовят, так как он быстро портится.
15. Зверобой– многолетнее травянистое растение, встречающееся на лугах вдоль дорог, в огородах и садах. Настой травы благоприятно влияет на организм, нормализует секретно-моторные процессы, оказывает противовоспалительное действие на слизистую оболочку кишечника, повышает аппетит, обладает тонизирующим, регенеративным действием.
Для приготовления настоя зверобоя 30 г травы заливают 1 л кипятка и настаивают в течение 1-2 ч в эмалированной посуде, затем процеживают через марлю. Настой дают животным в дозе 300-400мл на одну голову в теплом виде за полчаса до кормления 3 раза в день. Срок лечения 4-5 дней.
16. Змеевик– многолетнее травянистое растение, произрастающее на заливных лугах, лесных полях, среди кустарников. Отвар корневищ и корней змеевика обладает вяжущим, противовоспалительным действием, стимулирует деятельность пищеварительных желез.
При приготовлении отвара из корневищ и корней змеевика сырье измельчают до размера не более 5 мм. Затем сырье (50 г) заливают 1 л кипятка в эмалированной кастрюле, закрывают крышкой и нагревают на слабом огне 25-30 мин. Потом охлаждают при комнатной температуре в течение 10 мин. После процеживания, остатки сырья отжимают и в полученный отвар доливают кипяченой воды до 1 л. Выпаивают отвар змеевика в теплом виде по 200-250 мл на голову за полчаса до кормления 3 раза в день. Срок лечения 3-4 дня.
Наилучший терапевтический эффект получают при совместном применении указанных лекарственных растений по 200-250 мл на голову 3 раза в день за полчаса до кормления. Настои и отвары необходимо готовить ежедневно (Б. Авакаянц и др., 1992).
17. Настой сосновой хвои – мелкие ветки сосны измельчают, помещают в емкость, заливают горячей водой из расчета 1 кг хвои на 10 л воды, укутывают и выдерживают в течение 1-2 часов, тщательно процеживают через два слоя марли и выпивают по 10-30 мл 2-3 раза в день. Настой хвои показан при авитаминозе С у телят (П.Г. Захаров, 1998).
ПОЛЕЗНО ЗНАТЬ
Знаете ли Вы что:
Искусственное осеменение крупного рогатого скота в Приморском крае начало применяться с 1937 г. Первым техником осеменатором была Анна Поликарповна Чех, с. Ленинское, Хорольского района.
Метод длительного хранения спермы в глубокозамороженном состоянии начал применяться в нашей стране с 1964 г. В Приморском крае первая корова была осеменена такой спермой 22 июля 1968 г. (пос. Угловое Артемовского совхоза).
В спермобанке ООО «Племпредприятие «Приморское» хранится более 450 тыс. доз замороженной спермы ценнейших быков — производителей четырех пород. Из имеющихся 117 быков-производителей 41 улучшатели. Продуктивность матерей быков от 6 до 13 кг молока за лактацию. Жирность молока от 3,8 до 5 %.
За один отел приплод может составлять до 7 телят. Именно столько родила в 1964 г. корова из Могилева (Белоруссия) по кличке Любик.
Самое большое количество телят, которое в течение жизни может принести корова — это 30 телят.
Самую крупную живую массу среди представительниц «слабого пола» имела корова по кличке Мунтгара-дин. Когда ее взвесили, то стрелка весов показала 2267 килограммов. Объем ее «талии» был равен 3,96 метра.
Наибольший официально зарегистрированный вес был у быка по кличке Гора Катадин (США) – 2280 кг (гибрида голштинской и шортгорнской пород). Рост быка 1 м 88 см, а обхват туловища достигал четырех метров.
В 1982 году на сельскохозяйственной выставке под Парижем центральной фигурой была корова Тина. От нее за один только год было получено более 100 эмбрионов. Сорок из них были пересажены другим коровам и благополучно прошли весь цикл своего развития. Остальные были заморожены для продолжения экспериментов.
Рекордный суточный удой зафиксирован кубинскими животноводами. Корова по кличке Урбе Бланка (что в переводе с испанского «белое вымя») дала 109 килограммов 300 граммов молока.
В нашей стране суточный удой коровы Россиянки уральской черно-пестрой породы составил 82,5 килограммов молока жирностью более 4 процентов (4,18).
Рекорд по жирномолочности принадлежит американской корове гол-штино-фризской породы по кличке Бризвуд Пэтси Бар Понтиак. От нее в возрасте 10 лет 10 мес. за 305 дней лактации надоено 18805 кг молока с 4,6% жира, или 865 кг молочного жира.
Датский бык черно-пестрой породы по кличке Сеннер-Юлландз Енс оставил после себя 220 тыс. особей выжившего приплода, произведенного с помощью искусственного осеменения.
Наиболее высокий уровень молочной продуктивности достигнут в Дании коровой Лимелинг Сидней, от которой за 14 лет получено 211 235 кг молока жирностью 5,47 %.
Фермер из Зимбабве Кен Хармер вывел корову величиной с крупную собаку. В Мексике выведены еще более мелкие коровы с продуктивностью три-четыре килограмма молока в сутки.