Отбор доноров и реципиентов
Коров-доноров выбирают из племенного стада, хорошо реагирующих на гормональную обработку и дающих биологически полноценные эмбрионы. При отборе коров-доноров учитывают показатели молочной продуктивности, экстерьер и конституцию, желательный тип, линейную и породную принадлежность, что особенно важно для получения от этих животных высокоценных быков. Кроме того, корова-донор должна иметь известное происхождение, подтвержденное по группам крови.
Молочная продуктивность коров-доноров должна составлять 7-12 тыс. кг молока в год, жирностью 3,6-4,3%.
Животные, признанные донорами, должны быть здоровыми, иметь среднюю или заводскую упитанность и ненарушенный обмен веществ, нормально циклировать. Тщательным клинико-гинекологическим исследованием у них исключают патологические процессы в репродуктивных органах (эндометрит, цервицит и др.), а также структурные изменения на почве перенесенных болезней. Идеальный возраст коров для включения в группу доноров — 4-5 лет. По достижении 8-летнего возраста суперовуляторный ответ начинает снижаться.
На суперовуляцию коров-доноров обычно ставят не раньше 60 дней после отела. На протяжении всего срока использования в качестве донора коровам организуют полноценное кормление при умеренной даче силоса и концентрированных кормов, ежедневно предоставляют активный моцион.
В качестве реципиентов можно использовать как коров, так и телок. При составлении плана пересадок эмбрионов следует учитывать вероятность выбраковки 20-25% животных реципиентов из-за непригодности к воспроизводству вообще или из-за отсутствия активного желтого тела в яичниках в конкретно намеченные сроки пересадки. Телки — реципиенты должны иметь хорошо развитые органы воспроизведения с нормальными половыми циклами.
Для наиболее распространенных молочных и молочно-мясных пород телки — реципиенты в 16-18 мес. должны иметь живую массу не ниже 350-380 кг. Коровы-реципиенты должны быть клинически здоровыми и не старше 7 лет. Минимальный срок пересадки — не ранее 60-го дня после отела.
Суперовуляция
Известно, что количество первичных фолликулов в яичниках половозрелой телки колеблется от 100 тыс. до 1 млн. Однако в процессе онтогенеза лишь небольшая часть из них реализуется в виде потомков. Остальные же овоциты подвергаются атрезии (обратному развитию) и в воспроизводстве не участвуют.
Суперовуляцией (множественной овуляцией, полиовуляцией) называют состояние, вызванное гормонами, когда в яичниках животных развивается и овулирует в несколько раз больше яйцеклеток, чем при естественных условиях.
Метод суперовуляции разработал наш соотечественник М.М. Завадов-ский (1934). Он установил, что при введении сыворотки жеребых кобыл /СЖК/ у самок возрастает количество созревших фолликулов. В настоящее время все методы индукции овуляции основаны на использовании гормональных препаратов. В зависимости от вида животных число овулирующих яйцеклеток может быть увеличено в 3-8 и даже в 50 раз. С помощью суперовуляции становится возможным получение большого количества эмбрионов от лучших по продуктивности животных.
Гонадотропин СЖК лучше всего применять в середине полового цикла: с 8-го по 15-16 день. Препараты вводят однократно в дозе от 2 тыс. до 3 тыс. ИЕ. Через 48 ч после введения ГТЖК инъецируют простагландин ПГФ2или одно из его синтетических аналогов. Обычно через 2 дня наступает стадия возбуждения полового цикла с проявлением течки, охоты и овуляции. В этот период осеменяют коров-доноров.
С целью вызывания множественной овуляции применяют препараты фолликулостимулирующего гормона /ФСГ/. Отечественный препарат ФСГ супер по биологической активности и степени очистки не уступает импортным препаратам подобного назначения. Хороший эффект достигается при обработке ФСГ супер с 9-х по 12-е сутки полового цикла. ФСГ супер инъецируют дважды в сутки — утром и вечером с интервалом в 12 ч по 4-8 мг. На третьи сутки после начала обработки инъецируют эстрофан в дозе 500 мкг /2,0 мл/, через 12 ч половинную дозу. Применяя эту схему, получают в среднем 5,3 полноценных эмбриона на донора.